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ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
產品名稱 | MT小鼠褪黑素ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Mouse Melatonin, MT Elisa Kit |
貨號 | FS-M64190 |
公司“質量是企業是生命之源”,選購優勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產品僅用于科研可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質金屬蛋白酶等等?
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
CXCL14 CXC趨因子14抗體 現貨供應 0.2ml Cefpirome
PhosphoAurora B(Thr232)/Aurora C(Thr198) 有絲分裂激酶B/C抗體 現貨供應 0.1ml Amisulprided5
PhosphoAurora A(Thr288) 有絲分裂激酶A抗體 現貨供應 0.1ml Meropenem with sodium carbonate
CXCL16 CXC趨因子16抗體 現貨供應 0.1ml Meropenem Sodium Salt
Secretin 分泌素抗體 現貨供應 0.1ml 6,8Dimethoxy Moxifloxacin Hydrochloride
SCAP/SREBF chaperone protein 固調節元件結合蛋白裂解激活蛋白抗體 現貨供應 0.2ml 8Ethoxy Moxifloxacin
Secretin receptor 分泌素受體抗體 現貨供應 0.2ml 8Desmethoxy8fluoro Moxifloxacin
SEL1L SEL1L抗體 現貨供應 0.1ml rac cisMoxifloxacin AcylβDglucuronide
matrix metalloproteinase 13英文簡稱MMP13二酯酶7B抗體 檢測范圍:7420nmol/L320ng/mL
antiActin antibody英文簡稱AAA先天性眼外肌纖維相關蛋白FEOM2抗體 檢測范圍:7421nmol/L400pg/mL
Soluble Intercellular Adhesion Molecule 1英文簡稱sICAM1神經母瘤蛋白PHOX2B抗體 檢測范圍:7422nmol/L400ng/mL
soluble endothelial protein C receptor英文簡稱sEPCR周期蛋白依賴性激酶5激活因子1抗體 檢測范圍:7423nmol/L320ng/mL
PRRSAb英文簡稱PRRSAb多囊腎蛋白1樣3抗體 檢測范圍:7424nmol/L24U/L
tyrosine kinase A英文簡稱TrkA肌醇相互作用蛋白抗體 檢測范圍:7425nmol/L8ng/mL
tyrosine kinase B英文簡稱TrkB蛋白激酶C/pPKC ε抗體 檢測范圍:7426nmol/L2000pg/mL
tyrosine kinase C英文簡稱TrkC嘌呤核苷酶抗體 檢測范圍:7427nmol/L8ng/mL
Peptide YY英文簡稱PYY浦肯野相關蛋白1抗體 檢測范圍:7428nmol/L16pmol/L
pJAK2英文簡稱pJAK2凋亡誘導受體PLEKHG5抗體 檢測范圍:7429nmol/L40pg/mL
epidemic diarrhea virus antibody英文簡稱PEDV Ab蛋白質酶2AB55抗體 檢測范圍:7430nmol/L8ng/mL
heparin sulphate protoglycans英文簡稱HSPG棕櫚酰蛋白水解酶2抗體 檢測范圍:7431nmol/L48ng/mL
heparan sulfate英文簡稱HS多谷酰結合蛋白1抗體 檢測范圍:7432nmol/L120ng/mL
Immunoglobulin G1英文簡稱IgG1肌動蛋白相關蛋白2/3復合體亞基5抗體 檢測范圍:7433nmol/L16mg/mL
Immunoglobulin G2英文簡稱IgG2蛋白質精亞型2抗體 檢測范圍:7434nmol/L8000μg/mL
硝苯地平雜質B Nifedipine impurity B 規格:30mg
硝苯地平雜質A Nifedipine impurity A 規格:30mg
硝苯地平 Nifedipine 規格:100mg
洛芬 Tong Luofen 規格:100mg
替硝唑 Tinidazole 規格:100mg
舒林 Sulindac 規格:50mg
雙芬鈉 Diclofenac sodium 規格:100mg
曲安西龍 Qu Anxilong 規格:50mg
葡萄糖鋅 Zinc gluconate 規格:200mg
撲米 Primidone 規格:50mg
萘普生鈉 Naproxen sodium 規格:50mg
普拉睪鈉 Sodium Prasterone Sulfate 規格:50mg
MT小鼠褪黑素ELISA試劑盒實驗原理磷化外信號調節激酶5抗體Monkey PDCN (Podocin) ELISA Kit
磷化外信號調節激酶5抗體Monkey CCSA-3 (Colon Cancer Specific Antigen-3) ELISA Kit
外信號調節激酶4抗體Monkey MT1M (Metallothionein 1M) ELISA Kit
腸出血性大腸桿菌埃希氏菌O157:H7抗體Monkey TSP-2 (Thrombospondin-2) ELISA Kit
磷化絲裂原活化蛋白激酶ERK抗體Monkey dDAVP (1-Desamino-8D-Arginine Vasopressin) ELISA Kit
CD312抗體Monkey TARC (Thymus Activation Regulated Chemokine) ELISA Kit
eIF4E結合蛋白抗體Monkey ACO1 (Aconitase 1) ELISA Kit
磷化表皮生長因子受體抗體Monkey α-EP (α-Endomorphin) ELISA Kit
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
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