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服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。
產品名稱 | 分類 | 貨號 |
羊種特異性基因核酸檢測試劑盒 | 熒光PCR法 | FS-P10224 |
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR技術的定量原理:?
擴增曲線
在Real-time qPCR中,對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應的進行,監測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應過程中產生的DNA拷貝數是呈指數形式增加的,隨著反應循環數的增加,最終PCR反應不再以指數形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產物已不再呈指數級的增加,PCR的終產物量與起始模板量之間無線性關系,所以根據最終的PCR產物量不能計算出初始模板量。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務:DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
多頭節叢孢生長條件: 25-28℃培養基: 18提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no -80℃冰箱凍結法;礦物油法;定期移植法
-132℃冰箱凍結;真空冷凍干燥
空腸彎曲桿菌科研教學模式菌株: no雞泄殖腔提供形式: 凍結物安全等級: 2培養基: 0生長條件: 42
新型隱球酵母生長條件: 28℃培養基: 206提供形式: 斜面培養物安全等級: 2模式菌株: no -80℃冰箱凍結法
小單孢菌屬抗細菌;抗枯草芽孢桿菌;抗金黃色葡萄球菌;抗瘧疾模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養物安全等級: 1培養基: CM0012生長條件: 35-37C
地衣芽孢桿菌生長條件: 30℃培養基: 598提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 真空冷凍干燥法
鏈狀假絲酵母近海酵母模式菌株: no生物樣/海漆/根泥提供形式: 斜面培養物安全等級: 1培養基: 513生長條件: 28℃
里拉微球菌飼料用植酶等的篩選模式菌株: no草魚腸胃道提供形式: 斜面培養物安全等級: 1培養基: 0002生長條件: 37℃
-133℃冰箱凍結;真空冷凍干燥
小單孢菌屬抗細菌;抗金黃色葡萄球菌;抗枯草芽孢桿菌;抗真菌;抗黑曲霉;抗瘧疾模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養物安全等級: 1培養基: CM0012生長條件: 35-37C
白靈側耳(白靈菇)培養基: CM0017用于食用菌。提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 25℃ 礦物油法
季也蒙畢赤酵母培養基: 821生物活性物質篩選沉積物/褐黑色沉積物上覆水提供形式: 斜面培養物模式菌株: no生長條件: 25℃ 液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
pTargetF模式菌株: 未知
AS3.951產蛋白酶模式菌株: no種屬: Aspergillus│oryzae提供形式: 凍干物安全等級: 1培養基: CM0014生長條件: 25~28℃
75-049吸收及檢定霍亂診斷血清用 非O1模式菌株: no種屬: Vibrio│cholerae non-O1提供形式: 凍干物安全等級: 3培養基: CM0116生長條件: 37℃
-134℃冰箱凍結;真空冷凍干燥
抗生素檢定培養基6.5-6.7)250g藥品抗生素效價測定
MUG培養基 100(g) incubation media MUG培養基 100(g)
EC-MUG培養基 100g 多管發酵法測定生活飲用水及其水源水中的大腸埃希氏菌(GB/T5750.12-2006)。
玫瑰紅鈉瓊脂RoseBengalMedium霉菌、酵母菌計數
SulfiteIronAgar
BiGGY瓊脂 BiGGY Agar 250克 念珠菌的分離培養
硝胺孟加拉紅瓊脂 DRBC Agar 250克 食品中霉菌及酵母菌的分離培養
WORT瓊脂 WORT Agar 250克 真菌,特別是酵母菌的計數和增菌培養
WORT肉湯 WORT Broth 250克 真菌和酵母菌的培養
羊種特異性基因核酸檢測試劑盒玫瑰紅鈉瓊脂規格:BR250g詳情介紹
改良纖維二糖-多粘菌素B-多粘菌素E瓊脂基礎(MCPC)規格:纖維二糖詳情介紹
艾格瓊脂規格:250g用途:用于過程中無菌監測
性蛋白胨水顆粒規格:250g用途:用于霍亂弧菌選擇性增菌培養(SN標準)
品紅亞硫鈉瓊脂平板(9cm)規格:10個/包用途:用于飲用水、水源水中總大腸菌群的選擇性分離和確證
瓊脂培養基N(化十六基三瓊脂)規格:250g用途:用于綠膿假單胞菌的分離培養
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存備用。
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
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