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NIH/3T3小鼠胚胎細胞

參  考  價:1500
具體成交價以合同協議為準
  • 型號

  • 品牌

  • 廠商性質

    經銷商

  • 所在地

    上海市

規格

1×106 1500元 15件可售

更新時間:2024-07-08 16:58:26瀏覽次數:196次

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貨號 A01X1090 規格 1×106cells/T25培養瓶
細胞形態 成纖維細胞樣 生長特性 貼壁細胞
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產品名稱

NIH/3T3小鼠胚胎細胞

貨號

A01X1090

規格

1×10?cells/T25培養瓶

英文名

NIH3T3:NIH/3T3

分類

小鼠系

用途

僅供科研研究實驗

 

商品介紹:

別稱

NIH/3T3

種屬

小鼠

年齡(性別)

胚胎

組織來源

胚胎

生長特性

貼壁細胞

細胞形態

成纖維細胞樣

詳情簡介

NIH/3T3細胞是從NIH Swiss小鼠胚胎培養物中建立的高度接觸性抑制的連續傳代細胞株。為了培育在形態學特征上更適合于進行轉化分析的亞株,建立的NIH/3T3細胞株又進行了5輪以上亞克隆。NIH/3T3細胞對肉瘤病毒的轉化灶形成和白血病病毒的繁殖高度敏感,對DNA轉化及轉染研究十分有用;NIH/3T3細胞鼠痘病毒陰性。

生物安全等級

1

生長培養基

DMEM10% CS1% P/S

 

推薦傳代比例

1:3-1:4

推薦換液頻率

2~3/

倍增時間

~20小時

凍存條件


凍存液

55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO

溫度

液氮

培養條件


氣相

空氣,95%CO25%

溫度

37℃

 


別稱公司所有產品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療,僅可用于工業或科研等非醫療目的。


NIH/3T3小鼠胚胎細胞


細胞凍存注意事項:
(1)  細胞的收獲
用來凍存的細胞一般選擇在細胞約鋪滿 90% 的時候,這時細胞生長狀態好,細胞數量也多,并且在收獲細胞前 24 小時換一次培養液。收獲用來凍存的細胞開始時方法和平時一樣,用 100xg 離心 5 分鐘收集細胞再重懸,活細胞記數。稀釋或濃縮到細胞保存的最終細胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細胞 /ml ),加入已經配好的等體積的培養液保護劑混合溶液中輕輕混勻,分裝到凍存管,冷凍保存。
(2)  保護劑的使用
細胞凍存中, 一般使用DMSO 作為保護劑。在細胞凍存中, DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ,某種具體細胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細胞特別是雜交瘤細胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養液或血清配成最終濃度的2倍,再與等體積的懸浮細胞的培養液混合。
(3)  細胞凍存的速率
細胞的冷凍速率最適控制在讓細胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導致細胞損害。對大多數細胞來說,每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細胞先在-20℃1-2個小時,再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再轉入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4)  儲存環境
細胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態層溫度在 -140℃至 -180℃之間,細胞可保存在氣態層或浸入液氮中,如果可能最好保存在氣態層,因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內只能存儲少量液氮,需要經常添加)。細胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。

NIH/3T3小鼠胚胎細胞


公司正在出售的產品:

7型膠原抗體 英文名;Collagen VII細胞質PSD95相互作用因子抗體

8號染色體開放閱讀框12抗體 英文名;C8orf12細胞質脆性X智力低下蛋白結合蛋白2抗體

8號染色體開放閱讀框192抗體 英文名;C6orf192細胞質多聚腺苷酸結合蛋白1抗體

8號染色體開放閱讀框30a抗體 英文名;C8orf30A細胞質多聚腺苷酸結合蛋白2抗體

8號染色體開放閱讀框31抗體 英文名;C8orf31細胞質多聚腺苷酸結合蛋白3抗體

8號染色體開放閱讀框33抗體 英文名;C8orf33細胞質多聚腺苷酸結合蛋白4抗體

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8號染色體開放閱讀框45抗體 英文名;C8orf45細胞質連接蛋白2抗體

操作步驟:

(1) 細胞系培養:取6cm細胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養液,37℃ CO2培養密度至40%~60%,密度過大,轉染后不利篩選細胞。

(2) 轉染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉染每一個孔細胞所用的量)

A液:用不含血清培養基稀釋1ug 質粒DNA。

B液:用不含血清培養基稀釋2ul脂質體。

分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。

(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。

(4) 轉染準備:用1mL不含血清培養液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養液。

(5) 轉染:把A/B復合物緩緩加入培養液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時,吸除無血清轉染液,換入正常培養液繼續培養。

(6) 瞬時轉染后,可在48h-72h細胞長滿之后,提取細胞蛋白或者RNA,驗證敲減/過表達效率。


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