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貨號	FS-X10539

培養操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；

5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

中文名稱：BMPI型受體激酶抑制劑

英文名稱：LDN193189 Hydrochloride

產品規格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg

貨號：FS-X10539

產品介紹:

LDN193189hydrochloride是一種選擇性的BMPI型受體激酶抑制劑，抑制BMP I型受體ALK2和ALK3的轉錄活性(IC50分別為5nM和30nM)，對TGF-β I型受體ALK4，ALK5和ALK7具有微弱的作用效果(IC50≥500nM)。

注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！

號：1062368-62-0

純度：99.68%

分子量：552.33

儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

紅曲霉UBXN2B蛋白抗體Anti-LAMP1 Antibody生長激促分泌受體(GHSR)

疣孢馬杜拉放線菌上調基因4抗體(N端)Anti-LASP1 Antibody生長激2(GH2)

根霉泛蛋白抗體Anti-LAT Antibody生長關聯蛋白43(GAP43)

洋蔥曲霉泛特異性蛋白28抗體Anti-LAYN Antibody生長分化因子9(GDF9)

節桿菌尿激型纖溶原激活因子抗體Anti-LATS1 Antibody生長分化因子5(GDF5)

翹鱗傘尿鹽重吸收轉運子1抗體Anti-LAT2 Antibody生長分化因子3(GDF3)

熱帶假絲酵母14號染色體開放閱讀框130抗體Anti-LBP Antibody生長分化因子11(GDF11)

棒桿菌屬去泛化3抗體Anti-LBR Antibody生長分化因子1(GDF1)

巴西果小克銀漢霉突觸囊泡融合蛋白Unc18-3抗體Anti-LBP Antibody生物酰(BTD)

片球菌屬泛蛋白連接E3α2抗體Anti-LCAT Antibody生精蛋白Ⅱ(SEMG2)

水管致黑棲熱菌腫瘤抑制基因UVRAG抗體Anti-LCAT Antibody生精蛋白Ⅰ(SEMG1)

爪哇青霉泛結合UFC1抗體Anti-LBP Antibody生肌因子6(MYF6)

紫色紅曲泛結合E2J1抗體Anti-LCAT Antibody生肌因子5(MYF5)

大腸埃希氏菌輔色C還原核心蛋白1抗體Anti-LCN1 Antibody滲透性糖蛋白(Pgp)

釀酒酵母核蛋白95抗體Anti-LCN2 Antibody滲出性玻璃體視網膜病變基因2(EVR2)

芽孢八疊球菌屬泛結合E2變異體1抗體Anti-LCK Antibody腎足蛋白(NPHN)

新型血小板相關血管內皮分泌蛋白SCUBE1抗體淋病奈瑟菌大鼠血管內皮細胞

應激誘導分泌蛋白1抗體層出鐮刀菌（斜面）大鼠腸微血管內皮細胞

抗腫瘤蛋白ANUP抗體淡紫色擬青霉（斜面）大鼠主動脈平滑肌細胞

琥珀亞基B560抗體層出鐮刀菌大鼠大隱靜脈內皮細胞
BMPI型受體激酶抑制劑宇佐美曲霉 6-氨基鄰甲酮還原1-B10

高羊肚 1,4-氘代二氧六環促黃體

膨大彎頸霉 2-(N-Fmoc)-氨基-1,3-丁二蛋黃脂肪

秦氏蜜環 Tris(6,6,7,7,8,8,8-heptafluoro-2,2-dimethyl-3,5-oc膽固

巨型艾美耳球蟲 5-氧化凋亡相關因子

巨枝膝梗霉 4-溴對三聯苯飽和脂肪

麥根腐平臍蠕孢 3,4-二氨基苯甲鈣

乳片球 L-纈乙酯鹽鹽磷

中國臺灣根霉雙(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二酮)鋇水合物瘟病

靈芝 3--4-病

彎孢 3--4-甲氧基苯馬立克病抗體

鹽水海桿狀 1,2-二氨基蒽醌傳染性支氣管炎病

白地霉 3-甲基環戊酮病H5亞型抗體

豌豆根瘤 N-(甲基)鄰苯二甲酰亞病H5亞型

雞傷門氏新戊二二縮水甘油H5N1IgG抗體
操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)