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貨號	FS-X10973

培養操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；

5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

中文名稱：CDK2，JAK2和FLT3抑制劑(SB1317)

英文名稱：SB1317

產品規格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

貨號：FS-X10973

產品介紹:

SB1317是一種有效的CDK2，JAK2和FLT3抑制劑，IC50分別為13，73和56nM。

注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！

號：937270-47-8

別名：TG02

純度：98.54%

分子量：372.46

儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

白僵菌凋亡原位（我公提供代測服務）Escherichia coli小鼠癌標志物-CA153

溜曲霉Escherichia coli小鼠胃腸癌標志物CA199

谷棒桿菌Escherichia coli小鼠胃腸癌標志物CA199

尖孢鐮刀菌Escherichia coli小鼠血紅氧合1(HO-1)

蚜蟲枝孢Escherichia coli小鼠血紅氧合1(HO-1)

豇豆慢生根瘤菌Escherichia coli小鼠磷脂A2(PL-A2)

大腸埃希氏菌Escherichia coli小鼠磷脂A2(PL-A2)

白色類諾卡氏菌（可定）Escherichia coli小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)

涎沫假絲酵母Escherichia coli小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)

殼青霉Escherichia coli小鼠水通道蛋白5(AQP-5)

臘梅擬莖點霉廣譜SP免疫組化（用于檢測兔、大鼠、小鼠和豚鼠來源的一抗）Escherichia coli小鼠水通道蛋白5(AQP-5)

矩圓黑盤孢SP免疫組化(兔)Escherichia coli小鼠水通道蛋白4(AQP-4)

雅致放射毛霉SP免疫組化(小鼠)Escherichia coli小鼠水通道蛋白4(AQP-4)

塔賓曲霉T淋巴亞群檢測盒（SAP法）Escherichia coli小鼠水通道蛋白3(AQP-3)

Sphingobacteriaceae封閉用正常山羊血清（原液）Escherichia coli小鼠水通道蛋白3(AQP-3)

解酯假絲酵母解酯變種封閉用正常兔血清（原液）Escherichia coli小鼠水通道蛋白1(AQP-1)

鼻咽上皮細胞特異性蛋白1抗體血痕韌革菌小鼠綠色熒光標記的肺癌細胞

軸突生長誘向因子4抗體粘滑菇屬HSF（DMEM(高糖）+15%FBS 澳洲胎牛）

核基質蛋白22復瓣黑刺革菌小鼠結締組織L細胞株929克（小鼠成纖維細胞）

神經內分泌轉化2抗體漏斗狀側耳人晶體上皮細胞永生系
CDK2，JAK2和FLT3抑制劑(SB1317)釀酒酵母 Carbamic acid甲基睪酮

釀酒酵母 Epinodosin腺活化蛋白激

谷棒桿Ⅰ型 Shikokianin腺活化蛋白激

Paenibacillus Glychionide A卵母成熟抑制因子

鳥微屬 Rubrisandrin AD-乳

曲霉 Eucalyptolic acid一氧化氮合成

釀酒酵母 Jacoumaric acid單氧化

大腸埃希 Platyconic acid A纖溶原

產蛋下降綜合征病 Rabdosin B巨噬移動抑制因子

球孢白僵 Kusunokinin低氧誘導因子1

曲霉 Prionoid B腦紅蛋白

匍匐曲霉原變種 Lucidal抗性磷5b

綠色木霉 Erythrinin A組織蛋白K

球孢白僵 Brosimacutin G骨特異性堿性磷B

大腸埃希氏 Bakuchalcone低氧誘導因子-1α
操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)