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貨號 | FS-X10796 |
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培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
英文名稱:SR9011
產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號:FS-X10796
產品介紹:
SR9011是一種REV-ERBα/β激動劑,作用于REV-ERBα和REV-ERBβ,IC50s分別為790nM和560nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! 號:1379686-29-9 純度:99.92% 分子量:479.04 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
水原市土地桿菌大鼠Ⅰ型前膠原N端前肽Anti-MRPL14 Antibody人生長激(HGH)
乳桿菌屬人白三烯D4Anti-MRPL13 Antibody人生長激(HGH)
嗜中溫寒冷桿菌小鼠抗核抗體Anti-MRPL15 Antibody人紅生成(EPO)
耐輻射奇球菌兔抑瘤MAnti-MRPL18 Antibody人紅生成(EPO)
小海綿羊肚菌小鼠鑰孔蟲戚血藍蛋白Anti-MRPL21 Antibody人紅生成受體(EPOR)
漢遜德巴利酵母大鼠解整合樣金屬蛋白9Anti-MRPL20 Antibody人紅生成受體(EPOR)
大腸埃希氏菌人N鈣黏蛋白/神經鈣黏蛋白Anti-MRPL24 Antibody人β-微管蛋白(TUBB)
短波單胞菌屬植物血凝Anti-MRPL22 Antibody人β-微管蛋白(TUBB)
松口蘑小鼠解整合樣金屬蛋白9Anti-MRPL24 Antibody人前列腺F2α(PGF2α)
美梅奇酵母大鼠c-fosAnti-MRPL32 Antibody人前列腺F2α(PGF2α)
大腸埃希氏桿菌兔血管生成2Anti-MRPL35 Antibody人總前列腺特異抗原(tPSA)
構巢曲霉植物生長激Anti-MRPL34 Antibody人總前列腺特異抗原(tPSA)
白地霉人肝結合性表皮生長因子Anti-MRPL39 Antibody人抗人類免疫缺陷病抗體(HIV)
阿舒假囊酵母植物凝脂Anti-MRPL40 Antibody人抗人類免疫缺陷病抗體(HIV)
雙孢蘑菇小鼠氧化型Anti-MRPL42 Antibody人解脲脲原體抗體(UU-Ab)
橄欖產色鏈霉菌大鼠c-jun Anti-MRPL42 Antibody人解脲脲原體抗體(UU-Ab)
環指蛋白146抗體亞側耳(元蘑)大鼠腹水癌細胞
RAS相關蛋白Rab5B抗體金針菇(黃)人膀胱移行細胞癌細胞
絲蛋白激1抗體蒜頭果白地霉人T淋巴瘤細胞
RAB3-GTP激活蛋白催化亞單位1抗體柿炭疽病人卵巢上皮細胞癌細胞
REV-ERBα/β激動劑(SR9011)香菇(Cr62) 尿瓊脂(PH7.2)微粒體甘油三酯轉運蛋白大亞基
雪葉擬盤多毛孢 新生霉(125ug/支)載脂蛋白B100
豬丹絲 N-BOC-O-芐基-L-絲固調節元件結合蛋白
普通變形 N6培養基(不含瓊脂和蔗糖)微粒體三酰甘油轉移
馬沙門氏陽性血清 B5培養基(不含瓊脂和蔗糖)微粒體甘油三酯轉運蛋白
淺絳紅鏈霉 1/2B5培養基(不含瓊脂和蔗糖)脂肪合成
地衣芽孢桿 改良MS培養基(不含瓊脂和蔗糖)彈性蛋白
雞傷門氏 MS培養基(不含瓊脂和蔗糖)CD44分子
拜氏不動桿 CAYE培養基腦啡肽
韓國游動微 釷鋯試劑類風濕因子
無花果曲霉 1-溴-2,4,6-三氟苯總膽紅
楊樹莖點霉 接種測試微生物瓊脂培養基粘蛋白5AC
柯柯鹽湖枝芽孢桿 種和底層瓊脂培養基生長釋放肽
根霉 MS培養基(含瓊脂,不含蔗糖)炭疽桿抗體
黃色鐮孢 1/4MS培養基(不含瓊脂和蔗糖)糖化血紅蛋白A1c
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
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