當前位置:上海撫生實業有限公司>>細胞生物學試劑>>抑制劑激活劑>> 泛PI3K/mTOR激酶抑制劑(VS-5584)
貨號 | FS-X10975 |
---|
英文名稱:VS-5584
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
貨號:FS-X10975
產品介紹:
VS-5584是一種泛PI3K/mTOR激酶抑制劑,抑制PI3Kα,PI3Kαmt H1047,PI3Kβ,PI3Kδ,PI3Kγ和mTOR,IC50分別為2.6nM,3.3nM,21nM,2.7nM,3nM和3.4nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! 號:1246560-33-7 別名:SB2343 純度:99.57% 分子量:354.41 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
泡盛曲霉顯影液試劑Escherichia coli小鼠脫氫表雄(DHEA)
斑玉蕈(真姬菇、蟹味菇)定影液試劑Escherichia coli小鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)
鏈格孢菌萘染色試劑盒Escherichia coli小鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)
炭黑曲霉TMB 2HCl 3,3’5,5’-四甲基聯二鹽Escherichia coli小鼠內皮脂肪(EL)
擬青霉硝纖維膜(NC膜;膜孔徑0.45um)Escherichia coli小鼠內皮脂肪(EL)
元蘑特產1號PVDF膜/二氟化樹脂膜(膜孔徑:0.45um)Escherichia coli小鼠碳酐(CA)
啤酒酵母弗氏*佐劑(美國SIGMA)Escherichia coli小鼠碳酐(CA)
鏈格孢屬弗氏不*佐劑(美國SIGMA)Escherichia coli小鼠降鈣基因相關肽(CGRP)
殼菌超低范圍蛋白質分子量標準(3.3-20.1kDa)/5條帶Escherichia coli小鼠降鈣基因相關肽(CGRP)
大腸埃希菌低范圍蛋白質分子量標準(14.4-97.4KDa)/5條帶Escherichia coli小鼠胃動(MTL)
茶褐斑盤多毛孢預染寬范圍蛋白質分子量標準(19-117KD)/6條帶Escherichia coli小鼠胃動(MTL)
葡萄座腔菌預染低范圍蛋白質分子量Marker(14.4-97.4kDa)/6條帶Escherichia coli小鼠生長抑(SS)
嗜熱脂肪地球芽胞桿菌XMOPSEscherichia coli小鼠生長抑(SS)
異常漢遜酵母超敏可逆型蛋白染色試劑盒Escherichia coli小鼠血纖蛋白原(Fbg)
大腸埃希氏桿菌可逆型蛋白轉移膜染色液Escherichia coli小鼠血纖蛋白原(Fbg)
廈門假單胞菌可逆型蛋白轉移膜染色液Escherichia coli小鼠血小板活化因子(PAF)
EGR1結合蛋白2抗體虎皮粘蓋牛肝菌豬小腸上皮細胞
NK2轉錄樣蛋白B抗體粘蓋牛肝菌大鼠腎足細胞
心臟特異性同源盒轉錄因子NKX2.5抗體彩色豆馬勃轉化人肝上皮細胞
核小體結合蛋白1抗體豹皮香菇小鼠顱頂前骨細胞亞克 14
泛PI3K/mTOR激酶抑制劑(VS-5584)乳粉 沙門氏(陽性 Neochamaejasmine A激動
棘孢青霉 Hypoglaunine A半胱
兔出血癥病 Toxyloxanthone D抗
Pseudomonas koreensis Gambogin腸激
地衣芽孢桿 Isogambogenin精
香菇 Reneilmol亞精
枯草芽孢桿 Isolintetralin腐
膠質芽孢桿(可以訂購) Pluviatolide尸
阿魏側耳 木二糖多聚球蛋白受體
慢生根瘤 Bursehernin轉化生長因子β1
相思根瘤 Curcumenone肌原纖蛋白
柱形胞鏈霉 Pasakbumin B過氧化物體增殖因子活化受體γ
埃及無色需堿 Bryonolol黑色代謝
球孢白僵 Nigranoic acid11-酮
乳桿屬 Sagittatoside B饑餓
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業自行提供,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業負責,儀表網對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規避購買風險,建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。