當前位置:上海撫生實業有限公司>>細胞生物學試劑>>抑制劑激活劑>> Met抑制劑(SGX-523)
貨號 | FS-X10873 |
---|
中文名稱:Met抑制劑(SGX-523)
英文名稱:SGX-523
產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號:FS-X10873
產品介紹:
SGX-523是Met抑制劑,IC50為4nM,對BRAFV599E,c-Raf,Abl和p38α無活性。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! 號:1022150-57-7 純度:99.21% 分子量:359.41 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
谷棒桿菌小鼠可溶性CD86Anti-RPS21 Antibody人胎盤催乳(HPL)
四川散斑殼大鼠肌紅蛋白Anti-RPS25 Antibody人胎盤催乳(HPL)
嗜熱脂肪芽孢桿菌人抗麥膠蛋白/麥溶蛋白抗體Anti-RPS25 Antibody人胎兒血紅蛋白(HBF)
熱帶假絲酵母小鼠胰島Anti-RPS23 Antibody人胎兒血紅蛋白(HBF)
蠟葉曲霉大鼠血栓B2Anti-RPS27L Antibody人抗巨病抗體IgM(anti-CMV IgM)
酒色青霉人抗磷脂酰絲抗體Anti-RPS3 Antibody人抗巨病抗體IgM(anti-CMV IgM)
日光鹽場喜鹽芽孢桿菌人抗磷壁抗體Anti-RPS4Y1 Antibody人抗弓形體IgM抗體(anti-tox IgM)
賴氏毛殼小鼠低氧誘導因子1αAnti-RPS6KA1 Antibody人抗弓形體IgM抗體(anti-tox IgM)
黑曲霉大鼠乙酰Anti-RPS4X Antibody人抗風疹病IgG抗體(anti-RV IgG)
大腸桿菌小鼠新生甲狀腺Anti-RPS6 Antibody人抗風疹病IgG抗體(anti-RV IgG)
*熱脂環芽胞桿菌人抗淋巴抗體Anti-RPS6KA1 Antibody人抗EB病抗體(EBV)
分枝節桿菌大鼠促甲狀腺釋放激Anti-RPS6KA2 Antibody人抗EB病抗體(EBV)
蘭鏈霉菌大鼠抗甲狀腺球蛋白抗體Anti-RPS6KA6 Antibody人孕受體(PGR)
粉紅單端孢小鼠胰淀Anti-RPS6KA4 Antibody人孕受體(PGR)
膠韌革菌人抗巨噬抗體Anti-RPS6KB1 Antibody人新生兒促甲狀腺(N-TSH)
假諾卡氏屬人抗甲狀腺過氧化物抗體Anti-RPS6KB1 Antibody人新生兒促甲狀腺(N-TSH)
抑制劑抗體火針層孔菌(斜面)大鼠腎足突細胞(原代)
味覺感受器蛋白T2R6抗體果生鏈核盤菌(斜面)大鼠海綿體內皮細胞
味覺感受器蛋白T2R38抗體蘇云金芽孢桿菌加拿大亞種小鼠骨髓間充質干細胞
轉錄因子12抗體彩絨革蓋菌(斜面)人胎盤滋養層細胞
Met抑制劑(SGX-523)橙色鏈霉 李氏增肉湯(LB1,LB2)基礎沉默調節蛋白3
消化乳桿 糖發酵基礎肉湯沉默調節蛋白4
產硫芽孢桿 沉默調節蛋白5
廣西微枝 李氏選擇性培養基基礎(MMA)沉默調節蛋白6
玫瑰孢鏈霉 沉默調節蛋白7
香菇 吖啶黃亮
鑲邊鏈霉 萘啶酮維生E
雜色曲霉 精葡萄糖斜面瓊脂(AGS)戌型肝炎病抗原
冷海水黃桿 T1N3肉湯鏈球抗原
枯草芽胞桿 T1N0肉湯胃蛋白
松樹紅酵母 T1N1瓊脂Ca-ATP
谷棒桿 霍亂雙糖鐵瓊脂(KIA)β-防御2
空腸彎曲桿 血瓊脂基礎去泛化
非褶目暗黃層孔 嗜鹽選擇性瓊脂流行性腹瀉病IgG抗體
耐壓希瓦氏 蔗糖瓊脂流行性腹瀉病IgA抗體
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業自行提供,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業負責,儀表網對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規避購買風險,建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。