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熱休克蛋白90抑制劑(Ganetespib)

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更新時間:2022-05-18 13:14:21瀏覽次數:177次

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貨號 FS-X10375
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中文名稱:熱休克蛋白90抑制劑(Ganetespib)

英文名稱:HSP90 Inhibitor

產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg

貨號:FS-X10375

產品介紹:

英文名稱:HSP90 Inhibitor

產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg

Ganetespib是一種*的熱休克蛋白90(HSP90)抑制劑,在OSA8細胞中,其IC50值為4nM。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途!

號:888216-25-9

別名:STA-9090

純度:99.56%

分子量:364.4

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

竹喙球菌性受體NK-p80抗體Human TGFβ3(Transforming Growth Factor Beta 3) 肌質/內質網鈣ATP(ATP2A1)

擬莖點霉粘附分子CD112抗體Human TGFβ2(Transforming Growth Factor Beta 2) 肌抑(MSTN)

乳桿菌屬腎小球粘附分子受體抗體Human Trx(Thioredoxin) 肌養蛋白(dystrophin)

黃色短桿菌成纖維核受體Nr5a2抗體Human TM(Thrombomodulin) 肌生成(MYOG)

大腸埃希菌鈉鈣交換蛋白1抗體Human RETN(Resistin) 肌激同工MM(CK-MM)

黑附球菌鈉鈣交換蛋白3抗體Human TGFBI/βIG-H3(Transforming growth factor-beta-induced protein ig-h3) 肌激同工MB(CK-MB)

棒桿菌屬天冬受體抗體Human TEK/Tie-2(Angiopoietin Receptor Tie2) 肌激同工BB(CK-BB)

球黑孢菌磷化核因子2相關因子2(Ser40)抗體Human REN(Renin) 肌激(CK)

長枝木霉Nemo樣激抗體Human IgM(Immunoglobulin M) 肌生成抑制(MSTN)

水生拉恩氏菌磷化Nemo樣激抗體Human TG(Thyroglobulin) 肌肉骨骼受體酪激抗體(MUSK Ab)

大腸埃希氏菌磷化NIFK抗體Human tTG(Tissue transglutaminase) 肌球蛋白重鏈(MHC)

阿爾通山堿線菌磷化NIFK抗體Human hCG-H(Hyperglycosylated Chorionic Gonadotropin) 肌球蛋白輕鏈激(MLCK)

克魯斯假絲酵母NCKAP5蛋白抗體Human PR-3(Proteinase-3) 肌球蛋白輕鏈(MLC)

阿魏側耳一氧化氮合轉運誘導抗體Human LTF(Lactoferrin) 肌球蛋白(MYS)

慢生根瘤菌中性鞘磷脂相關因子抗體Human FSH(Follicle-Stimulating Hormone) 肌強直蛋白蛋白激(DMPK)

鏈霉菌人白介3介導核因子抗體Human SPINK1/TATI(Pancreatic secretory trypsin inhibitor) 肌腱蛋白R(TN-R)

副氧化微桿菌Microbacterium│paraoxydans 質量規格:>95%,BR丹皮

巨型艾美爾球蟲Eimeria│maxima 質量規格:>99%,BR薄荷

蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質量規格:>98.0%,進口原裝虎杖
熱休克蛋白90抑制劑(Ganetespib)Prauserella L-3-(2-萘基)-血管生成2

蠟狀芽孢桿 碳銣血管生成受體酪激1

貝倫格葡萄座腔梨生專化型 2,3-二甲吡啶血管生成受體酪激2

少根根霉 4,4'-雙(N-咔唑)-1,1'-聯苯血管生成樣蛋白2

欽海特德沃斯氏 雙[2-(2-苯并噻唑基)]鋅血管生成樣蛋白3

谷棒桿 2-羥基苯乙酮血管性血友病因子

包圍漆斑 3,3,5-三-L-甲狀腺原血管抑;血管穩定蛋白

巨大球屬 N-乙酰-DL-谷血紅蛋白

康氏假單胞 3-羥基-4-血紅蛋白晚期糖基化終末產物

硬水黃桿 2-(2-氨基苯基)-1H-苯并咪唑血紅氧合1

不動桿 4-溴-4',4''-二甲基三苯血紅氧合2

動物雙歧桿乳亞種 7-羥基喹啉血

黃硬皮馬勃 3-羥基喹啉血漿α顆粒膜蛋白

豬布魯氏 6-羥基喹啉血漿前激肽釋放

固氮 寡霉A血鈉

 


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