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貨號	FS-X10289

培養操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；

5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

中文名稱：MST1和MST2抑制劑(XMU-MP-1)

英文名稱：XMU-MP-1

產品規格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg

貨號：FS-X10289

產品介紹:

英文名稱：XMU-MP-1

產品規格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg

XMU-MP-1是可逆選擇性的MST1/2抑制劑，對MST1和MST2的IC50值分別為71.1和38.1nM。

注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！

號：2061980-01-4

純度：99.34%

分子量：416.48

儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

雅致小克銀漢霉基末端激3抗體Human PRTFDC1 胰島受體β(ISR-β)

黃柄曲霉磷化活化蛋白激B抗體Human PRRT1 胰島受體α(INSRA)

棲土曲霉JmjC結構域組蛋白去甲基化H3-K36抗體Human PSMA1 胰島生長因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)

黑化鏈霉菌組蛋白去甲基化JARID2抗體Human PRPF8 胰島生長因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)

環帶毛霉JAK和微管相互作用蛋白2抗體（JAK和微管相互作用蛋白2）Human PRUNE 胰島抗體(Anti-Ins)

麥芽糖假絲酵母活化蛋白激B抗體Human PRPH2 胰島降解(IDE)

分枝枝頂孢磷化蛋白酪激JAK-2抗體Human PRPSAP2 胰島(INS)

芽孢桿菌凋亡清除受體抗體Human PRPS1L1 胰島淀粉樣多肽(IAPP)

彎孢菌磷化原癌基因c-Jun抗體Human PRPS1 原激活肽(TAP)

副豬嗜血桿菌Notch配體Jagged 2蛋白抗體Human PRR13 原Ⅱ(Try-Ⅱ)

雪腐鐮孢組蛋白去甲基化Jarid1C抗體Human C13orf33(Uncharacterized protein C13orf33) (trypsin)

香港科恩氏菌組蛋白去甲基轉移JMJD1B抗體Human PRUNE 衣原體蛋白樣活性因子(CPAF)

可可鏈霉菌可可亞種親聯蛋白2抗體Human PRPF8 一氧化碳血紅蛋白(HbCO)

地衣芽胞桿菌驅動蛋白家族蛋白13B抗體Human PRPH2 一氧化化氮(NO)

蘇云金芽胞桿菌日本亞種驅動蛋白家族蛋白7抗體Human PRMT6 一氧化氮合(NOS)

地生翅孢殼CREB結合蛋白抗體Human PRMT8 一氧化氮合成(NOS)

芒弗里亞擬盤多毛孢Pestalotiopsis│mangifolia 質量規格：>98.0%(N)(T)馬錢

光神農球菌Agrococcus│baldri 質量規格：>97.0%(GC)蝙蝠葛堿

新月彎孢Curvularia│lunata 質量規格：>95.0%(HPLC)(T),用于高效液相色譜標記濱蒿內酯
MST1和MST2抑制劑(XMU-MP-1)大腸埃希氏對氧基肉桂血纖蛋白

蠟狀芽孢桿天門冬含NLR家族CARD域蛋白4

母雞乳桿己烯雌（順反異構混合物）血管內皮生長因子受體3

三葉草根瘤 1-甲基-4-羧血管內皮生長因子受體1

芽孢桿屬異基化磷三苯酯CpG寡脫氧核

香菇次卟啉透明質1

白曲霉 N-(1-甲基基)脲透明質1

小麥莖點霉 2-氟-4-羥基透明質2

地衣芽胞桿對溴鄰甲骨成型蛋白5

膠孢 4-甲氧基-3-甲激活受體ⅡA

四季腐霉洛索洛芬半乳糖

膠質芽孢桿(沒有可以提供的） D-焦谷乙酯甘露糖

香菇 2-甲基啉TNNI3

根霉 3,5-二苯頻哪酯TNNI3
操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)