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Chk1抑制劑(LY2603618)

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-18 15:57:31瀏覽次數:226次

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貨號 FS-X10544
Chk1抑制劑(LY2603618)正在熱銷的產品:Gax(growth arrest-specific homeobox) 生長終止特異性同源盒因抗原3-丁炔-2- 97%
GDF8/MSTN(growth differntiation factor 8) 生長分化因子8抗原3-丁炔-1- 97%
GDNF (Glial cell line-derived neurotrphic facto

產品介紹:

LY2603618是一種有效的選擇性的Chk1抑制劑,IC50為7nM。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途!

號:911222-45-2

別名:IC-83

純度:99.61%

分子量:436.3

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

中文名稱:Chk1抑制劑(LY2603618)

英文名稱:LY2603618

產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

貨號:FS-X10544

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

彎梗根霉絲/蘇激受體相關蛋白抗體Anti-LSM5 Antibody神經絲蛋白3(NEF3)

擬青霉線粒體輔色C還原核心蛋白2抗體Anti-LRTOMT Antibody神經束蛋白(NFASC)

短密青霉未分化胚胎干轉錄因子1抗體Anti-LSM7 Antibody神經上皮轉化基因1(NET1)

黑曲霉尾加壓2抗體Anti-LTA Antibody神經軟骨蛋白(NCDN)

麥芽糖假絲酵母尾加壓2相關肽抗體Anti-LSM8 Antibody神經連接蛋白3(NLGN3)

皺孢鏈霉菌荊豆凝集1抗體Anti-LTA Antibody神經連接蛋白2(NLGN2)

普通變形桿菌泛相關蛋白1抗體(鼻咽癌相關基因20蛋白)Anti-LTBR Antibody神經連接蛋白1(NLGN1)

哈茨木霉廣泛表達轉錄蛋白UXT抗體Anti-LTF Antibody神經顆粒(NRGN)

紫紅曲霉泛D抗體Anti-LTK Antibody神經介U(NMU)

環帶擬盤多毛孢珠蛋白抗體Anti-LUM Antibody神經介S(NMS)

桔青霉尿卟啉原脫羧抗體Anti-LUM Antibody神經介N(NMN)

嗜松青霉磷化信號淋巴活化分子CD150抗體Anti-LUM Antibody(PB0701)神經介B(NMB)

薄花邊傘2-1泛激活2B抗體Anti-LY6A Antibody神經膠質蛋白(GLDN)

擴展青霉ATP-依賴的RNA解旋p47抗體Anti-LYN Antibody神經降壓受體2(NTSR2)

鐮刀菌等上游激因子1抗體Anti-LY6C Antibody神經激肽A(NKA)

串珠鐮刀菌*泛化組蛋白H2AX抗體Anti-LYZ Antibody神經鈣黏蛋白(CDH2)

中斷位點蛋白STIL抗體水生異常球菌大鼠子宮頸上皮細胞

紡錘體組裝異常蛋白6抗體毛霉屬(斜面)大鼠子宮平滑肌細胞

減數分裂重組蛋白SPO11抗體殺鮭氣單胞菌大鼠卵巢上皮細胞

Smad蛋白E3泛連接1抗體梭形芽孢桿菌大鼠子宮成纖維細胞
Chk1抑制劑(LY2603618)枯斑擬盤多毛孢 3-(Boc-氨基)卵泡抑

野油菜黃單胞 氘代正辛烷-d18抗生物蛋白

柯奈尼亞小單孢 羰酰二氫三(三苯基膦)銥(I)抗胰蛋白

黃桿 2,3-二噻吩總膽紅

膝形假單胞 (溴甲基)環丁烷總蛋白

乳片球 反式二-(m)-雙[2-(二鄰甲苯基膦)芐基]乙二鈀(II)白蛋白

產桿 3-氟-5-(三氟甲基)血紅蛋白

 Trichosporon oleaginosus 3,5-二-4-羥基吡啶白介33

白淺灰鏈霉 2--4-甲氧基吡啶透明質

水嗜冷桿 二(三環己基膦)亞芐基二化釕過氧化氫

蘇云金芽胞桿 2-甲基煙乙酯

大腸埃希氏 1,6-二苯基-1,3,5-己三烯超氧化物歧化1

腫痂鏈霉 對羥基苯乙酰FK506結合蛋白12-雷帕霉相關蛋白

鮑氏志賀氏 2,2-二氟-2-(氟磺酰)醋鹽磷化外信號調節激

香菇 1-(3-氧基)-4-氟苯白介7

 


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