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貨號 | FS-01S63300 |
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產品名稱:MDA丙二醛檢測試劑盒微量法
規格:100管/96樣
檢測方法:微量法
貨號:FS-01S63300
商品介紹:
測定意義 氧自由基作用于脂質的不飽和脂肪酸,生成過氧化脂質;后者逐漸分解為一系列復雜的化合物,其中包括MDA。通過檢測MDA的水平即可檢測脂質氧化的水平。 測定原理: MDA與硫代巴比酸(thiobarbituric acid,TBA)縮合,生成紅色產物,在532nm有最大吸收峰,進行比色后可估測樣品中過氧化脂質的含量;同時測定600nm下的吸光度,利用532nm與600nm下的吸光度的差值計算MDA的含量。 需自備的儀器和用品: 可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。 1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。 4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。 8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。 |
粗酶液提取:
1、細胞或組織樣品的制備: 培養細胞:先收集細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細胞數量(104個):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1ml提取液),超聲波破碎細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。 2、血清(漿)樣品:直接檢測。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
小鼠凝血受體(TR)聯免疫試劑盒假單胞屬Akt2 (D6G4) Rabbit mAb
小鼠凝血敏感蛋白1(TSP-1) 聯免疫試劑盒糙孢籃狀Phospho-IRS-1 (Tyr1222) Antibody
小鼠凝血抗凝血復合物(TAT)聯免疫試劑盒科赫芽胞桿TrkA (D7U3A) Rabbit mAb
小鼠血栓調節蛋白(TM)聯免疫試劑盒平菇Phospho-IRS-1 (Tyr895) Antibody
小鼠促血小板生成抗體聯免疫試劑盒釀酒酵母Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (Alexa Fluor® 700 Conjugate)
小鼠促血小板生成受體抗體聯免疫試劑盒米川黃桿PKR Antibody
小鼠血栓B2(TXB2)聯免疫試劑盒白淺灰鏈霉Phospho-c-Kit (Tyr703) (D12E12) Rabbit mAb
小鼠血栓B4(TXB4)聯免疫試劑盒花園芽孢桿Phospho-c-Kit (Tyr703) (D12E12) Rabbit mAb
小鼠血栓前體蛋白(TpP)聯免疫試劑盒蘇云金芽胞桿松蠋亞種c-Kit (D13A2) XP® Rabbit mAb
小鼠絡絲蛋白(RELN)聯免疫試劑盒產黃青霉c-Kit (D13A2) XP® Rabbit mAb
小鼠胸腺表達趨化因子(TECK)聯免疫試劑盒草木樨中華根瘤Phospho-Met (Tyr1234/1235) (D26) XP® Rabbit mAb
小鼠甲狀腺球蛋白(TG)聯免疫試劑盒黑曲霉Phospho-Met (Tyr1234/1235) (D26) XP® Rabbit mAb
小鼠甲狀腺激抗體(TSAb)聯免疫試劑盒淡紫擬青霉Phospho-ROS1 (Tyr2274) Antibody
小鼠抗促甲狀腺受體抗體(TRAb)聯免疫試劑盒大腸埃希FastScan™ Phospho-SLP-76 (Ser376) ELISA Kit
小鼠促甲狀腺(TSH)聯免疫試劑盒細鏈格孢Phospho-Aurora A (Thr288) (C39D8) Rabbit mAb
MDA丙二醛檢測試劑盒微量法腫瘤轉移抑制蛋白1抗體Human CEP55 ELISA Kit葡聚糖T70
半胱蛋白蛋白-12抗體Human CD9(CD9 antigen) ELISA Kit明膠相關脂質運載蛋白(NGAL)ELISA試劑盒,NGAL ELISA kit
角蛋白17抗體Human CD94 ELISA Kit人黃體生成釋放(LHRH)ELISA試劑盒,LHRH ELISA
CD38抗體Human CEP63 ELISA Kit人雌二(E2)ELISA試劑盒,E2 ELISA
CD38抗體Human CDC25A ELISA Kit人脂多糖/內(LPS)ELISA試劑盒,LPS ELISA
碳酐1抗體Human CD32 ELISA Kit人γ基丁(GABA)ELISA試劑盒, GABA ELISA
碳酐2抗體Human CDC14B ELISA Kit人血管緊張Ⅰ轉化(ACEⅠ)ELISA試劑盒,ACEⅠ ELISA
絲/蘇蛋白質激抗體Human CEP68 ELISA Kit人蛋白激C(PKC)ELISA試劑盒,
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