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AAO抗壞血酸氧化酶紫外分光光度法

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廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-04-11 11:37:37瀏覽次數:116次

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貨號 FS-01S63283
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產品名稱:AAO抗壞血酸氧化酶檢測試劑盒紫外分光光度法

規格:50管/48樣

檢測方法:紫外分光光度法

貨號:FS-01S63283
商品介紹:

測定意義

AAO是定位于植物細胞壁的糖蛋白,屬“藍銅氧化酶"家族。細胞壁內的抗壞血酸和AAO與細胞壁的代謝和生長有著密切的聯系。AAO 氧化 AsA 所形成的 MDHA 可通過質膜上的細胞色素b還原,該過程中電子的跨膜運輸能夠促進細胞生長。

測定原理:

AAO可直接氧化AsA,通過測定AsA的氧化量,可計算得AAO活力。

實驗中所需儀器及設備:

低溫離心機、紫外分光光度計/酶標儀、1mL石英比色皿、可調式移液器、研缽、冰、蒸餾水。

試劑的組成和配制:

提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;

試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;

試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;

試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;

試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
QQ截圖20220307153604.png

粗酶液提取:

1、細胞或組織樣品的制備:

培養細胞:先收集細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細胞數量(104個):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1ml提取液),超聲波破碎細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

2、血清(漿)樣品:直接檢測。

操作步驟:

實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。

1.        加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8.       用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。

小鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體1(TRAIL-R1)試劑盒Human EDA(Ectodysplasin-A) ELISA Kit8號染色體開放閱讀框4抗體

小鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體3(TRAIL-R3)試劑盒Human EREG(Proepiregulin) ELISA KitCD73抗體

小鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體4(TRAIL-R4)試劑盒Human ANXA2(Annexin A2) ELISA Kit軸突相關粘附分子抗體

小鼠腫瘤蛋白53(TP53)試劑盒Human ACR(Acrosin) ELISA Kit6型膠原蛋白α5抗體

小鼠腫瘤特異生長因子/腫瘤相關因子(TSGF)試劑盒Human ANGPTL2(Angiopoietin-related protein 2) ELISA Kit神經粘附分子CALL抗體

小鼠酪(TRY)試劑盒Human TLR7(Toll-like receptor 7) ELISA Kit中性粒菌蛋白BP30抗體

小鼠泛蛋白(Ub)試劑盒Human EREG(Proepiregulin) ELISA Kit21號染色體開放閱讀框56抗體

小鼠高敏甲狀腺(u-T4)試劑盒Human TLR7(Toll-like receptor 7) ELISA KitTCD1抗體

小鼠高敏狀腺原(u-T3)試劑盒Human ACR(Acrosin) ELISA Kit角蛋白5抗體

小鼠尿激型纖溶原激活因子(PLAU/uPA)試劑盒Human PROM1(Prominin-1) ELISA Kit補體C9a抗體

小鼠肌酐(Cr)試劑盒  Human ANGPTL2(Angiopoietin-related protein 2) ELISA Kit20號染色體開放閱讀框141抗體

小鼠血管內皮生長因子B(VEGF-B)試劑盒Human OGDH(2-oxoglutaRate dehydrogenase, mitochondrial) ELISA Kit20號染色體開放閱讀框160抗體

小鼠血管內皮生長因子C(VEGF-C)試劑盒Human CCR4(C-C chemokine receptor type 4) ELISA Kit親環蛋白(親環)40抗體

小鼠血管內皮生長因子D(VEGF-D)試劑盒Human IKBKB(Inhibitor of nuclear factor kappa-B kinase subunit beta) ELISA KitT調控相關蛋白抗體

小鼠血管內皮生長因子受體3(VEGFR3/Flt4)試劑盒Human ROMO1(Reactive oxygen species modulator 1) ELISA Kit突觸后蛋白CRIPT抗體
AAO抗壞血酸氧化酶紫外分光光度法熒光Cy3標記豬胰島蛋白Anti-JDP2 Antibody小鼠蛋白激活受體-2(PAR2)elisa定量檢測試劑盒

(親和純化) 小鼠IgGAnti-JTB Antibody小鼠鳥基甲酰轉移(OCT)elisa定量檢測試劑盒

小鼠IgM (親和純化)Anti-JUNB Antibody小鼠相關血漿蛋白A(PAPP-A)elisa定量檢測試劑盒

(親和純化) 猴IgMAnti-JUN Antibody小鼠核RNA 輸出因子1(NXF1)elisa定量檢測試劑盒

Alexa Fluor 350標記小鼠IgG(流式同型對照)Anti-KAT2A Antibody小鼠蛋白酪磷O型受體(PTPRO)elisa定量檢測試劑盒

Alexa Fluor 555標記小鼠IgG(流式同型對照)Anti-KANK2 Antibody小鼠丙酮激M2型同工(M2-PK)elisa定量檢測試劑盒

兔抗小鼠IgA抗血清Anti-JUND Antibody小鼠環指蛋白4(RNF4)elisa定量檢測試劑盒

Alexa Fluor 647標記小鼠IgG(流式同型對照)Anti-KAT2B Antibody小鼠纖溶原激活物抑制因子1(PAI-1)elisa定量檢測試劑盒

 


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