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貨號 | FS-01S63762 |
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產品名稱:SAI土壤酸性轉化酶檢測試劑盒微量法
規格:100管/48樣
檢測方法:微量法
貨號:FS-01S63762
商品介紹:
測定意義 S-AI在pH 為4.5~5.0(酸性)條件下催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖,是土壤微生物蔗糖代謝關鍵酶之一。 測定原理: S-AI催化蔗糖降解產生還原糖,進一步與3,5-二硝基水楊酸反應,生成棕紅色氨基化合物,在510nm有特征光吸收,在一定范圍內510nm光吸收增加速率與AI活性成正比。 自備用品: 可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。 1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。 4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。 8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。 |
粗酶液提取:
1、細胞或組織樣品的制備: 培養細胞:先收集細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細胞數量(104個):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1ml提取液),超聲波破碎細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。 2、血清(漿)樣品:直接檢測。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
TRPM4 瞬時受體電位離子通道蛋白4抗體(M亞家族) * 0.2ml
DIS3L 有絲分裂控制樣蛋白DIS3L抗體 * 0.2ml
DIS3L2 有絲分裂控制蛋白樣DIS3L2抗體 * 0.2ml
DOM3Z DOM3Z蛋白抗體 * 0.2ml
DR1 protein 轉錄下調蛋白1抗體 * 0.2ml
Dermokine beta Dermokine β蛋白抗體 * 0.2ml
DPCR1 DPCR1蛋白抗體 * 0.2ml
DHFR 二氫葉還原抗體 * 0.2ml
DVL2 蓬亂蛋白2抗體 * 0.2ml
phospho-DVL2(Thr224) 磷化蓬亂蛋白2抗體 * 0.1ml
ODZ3/Teneurin 3 固生蛋白3抗體 * 0.2ml
ACCSL ACCSL蛋白抗體 * 0.2ml
FAM135B FAM135B蛋白抗體 * 0.2ml
FAM166A FAM166A蛋白抗體 * 0.2ml
HIDE1/C19orfC38 19號染色體開放閱讀框38抗體 * 0.2ml
SAI土壤酸性轉化酶檢測試劑盒微量法小鼠乳脫氫Anti-MAP2K3 Antibody小鼠骨橋(OPN)elisa定量檢測試劑盒
大鼠高鐵血紅蛋白Anti-MAP2K4 Antibody小鼠肝核因子1β(HNF1b)elisa定量檢測試劑盒
風疹胞病 IgM(捕獲法二步法)Anti-MAP2K6 Antibody小鼠透明質結合蛋白1(HABP1)elisa定量檢測試劑盒
弓形蟲抗體 IgG(間接法二步法)Anti-MAP3K10 Antibody小鼠線粒體解偶聯蛋白1(UCP-1)elisa定量檢測試劑盒
弓形蟲抗體 IgM(間接法二步法)Anti-MAP3K13 Antibody小鼠脂蛋白脂(LPL)elisa定量檢測試劑盒
弓形蟲抗體 IgM(捕獲法一步法)Anti-MAP3K10 Antibody小鼠高鐵血紅蛋白(MHB)elisa定量檢測試劑盒
弓形蟲抗體 IgM(捕獲法二步法)Anti-MAP3K20 Antibody小鼠生長分化因子15(GDF15)elisa定量檢測試劑盒
單純皰疹Ⅰ型病 IgG(間接法二步法)Anti-MAP3K20 Antibody小鼠生長因子受體結合蛋白7(Grb7)elisa定量檢測試劑盒
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