當前位置:上海撫生實業有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>其它ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96T載脂蛋白E4撫生ELISA試劑盒
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
載脂蛋白E4撫生ELISA試劑盒 | Apoprotein E4 | FS-P66120 |
公司“質量是企業是生命之源”,選購優勢如下:
1進口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產品僅用于科研可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質金屬蛋白酶等等?
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
少突膠質髓鞘相關蛋白抗體ompF(putative outer membrane porin F protein) 小腸結腸炎耶爾森氏菌膜通道蛋白抗原綿馬貫眾素ABBA(標準品)
CDC42結合蛋白激酶α抗體(MRCKα)OLFM1 peptide 嗅球蛋白1多肽抗原綿馬ABA(標準品)
髓樣分化蛋白抗體ORX-A(orexin-A) 增食欲素-A/欲激素A抗原莫諾苷
外周髓磷脂P0蛋白/P0蛋白抗體OTR(oxytocin receptor) 縮宮素受體牡荊素(標準品)
褪黑素受體1A/松果體素受體1A抗體OXR (Orexin receptor) 食欲素受體(多肽)牡荊素葡萄糖苷(標準品)
肌生成素抗體P2P-R/RBBP6(proliferation potential protein related) 增殖潛能相關蛋白抗原牡荊素鼠李糖苷(標準品)
磷化髓鞘轉錄因子1抗體P19ARF p19ARF抑癌因抗原木蝴蝶苷B(標準品)
DNA損傷關鍵蛋白Mre11抗體phospho-p38 ERK/MAPK14 (pThr180/pTyr182) peptide 磷化絲裂原活化蛋白激酶p38抗原磷霉素氨丁三
磷化DNA損傷關鍵蛋白Mre11抗體MKK3(MAP Kinase Kinase 3) 絲裂原活化蛋白激酶MKK3/6抗原磷霉素氨丁三(標準品)
蛋白激酶MST抗體P53(wt-p53) 腫瘤抑制因抗原(野生型P53)N-二乙亞硝;N-亞硝二乙
磷化蛋白激酶MST抗體Mtp53(Mutant type p53) 突變型P53抗原木犀草苷(標準品)
磷化肌球蛋白輕鏈2抗體WIG-1(wtp53-induced gene 1) 野生型p53誘導因1抗原木香烴內酯(標準品)
髓鞘轉錄因子1抗體P73 protein P73腫瘤抑制因抗原擬人參皂苷F11(標準品)
髓樣白血病-1抗體p70 S6 Kinase/P70 Beta1 p70S6Kb抗原擬人參皂苷RT5(標準品)
微管相關蛋白2抗體PALB2(partner and locaizer of BRCA2) 癌易感因相關蛋白2尿囊素(標準品)
載脂蛋白E4撫生ELISA試劑盒Anti-PIAS1 Antibody大腸埃希菌拉丁屬名: coli
Anti-PIAS1 Antibody淺黃鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces flaveolus
Anti-PIAS2 Antibody蕈青霉拉丁屬名: Penicillium paxilli
Anti-PIAS3 Antibody寄生曲霉拉丁屬名: Aspergillus parasiticus
Anti-PIAS4 Antibody球孢白僵菌用途: 昆蟲防治研究
Anti-PICALM AntibodyAchromobacter piechaudii用途: 益生菌
Anti-PIAS4 Antibody深綠木霉拉丁屬名: Trichoderma atroviride
Anti-PIGR Antibody棒桿菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Anti-PIGR Antibody木腐裂褶病菌拉丁屬名: Schizophyllum commune Fr.
Anti-PIK3CA Antibody毛韌革菌拉丁屬名: Stereum hirsutum
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
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