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貨號 | FS-X10292 |
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產品介紹:
英文名稱:SHP099 hydrochloride 產品規格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg SHP099 hydrochloride是有效選擇性的SHP2抑制劑,IC50值為70nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! 號:1801747-11-4 純度:99.40% 分子量:388.72 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
中文名稱:SHP2抑制劑
英文名稱:SHP099 hydrochloride
產品規格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號:FS-X10292
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
云芝驅動蛋白家族蛋白3抗體Human PRCC 血小板相關補體3(PAC3)
中生根瘤菌驅動蛋白2抗體Human PRKAR1A(Protein kinase cAMP-dependent type I regulatory subunit alpha) 血小板生長因子(PGF)
枯草芽孢桿菌KIAA1522蛋白抗體Human PRDM10 血小板生成(TPO)
漢遜德巴利酵母離子通道四聚體結構域蛋白5抗體Human PRKAR1B 血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP-Ⅳ)
芽孢桿菌高分子量激肽原重鏈抗體Human PRDM15(PR domain zinc finger protein 15) 血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)
毛栓孔菌通道四聚體結構域蛋白11抗體Human PRDM4 血小板堿性蛋白(PBP/CXCL7)
貝倫格葡萄座腔菌梨生?;?/span>Kelch樣蛋白26抗體Human PRKD2 血小板活化因子(PAF)
滑菇賴,天冬,谷,亮相關序列抗體Human PREB 血小板反應蛋白/凝血敏感蛋白1(TSP-1)
產黃青霉Kelch樣蛋白10抗體Human PRKCDBP 血纖肽/纖維蛋白肽B(FPB)
蠟樣芽孢桿菌Kelch樣蛋白11抗體Human PRKAR2B 血纖肽/纖維蛋白肽A(FPA)
彎孢菌Kelch樣蛋白3抗體Human LALBA(Alpha-lactalbumin) 血纖蛋白原降解產物(FDP)
云芝Kelch樣蛋白14抗體Human PRELID1 血纖蛋白原γ鏈(FGG)
短桿菌Kelch樣蛋白31抗體Human DHH(Desert hedgehog protein) 血纖蛋白原(Fbg)
CystofilobasidiumKelch樣蛋白32抗體Human PPP4R2 血纖蛋白(Fibrin)
致病擬桿菌電壓閥門通道混合器相關亞家族成員5抗體Human PRKG2 血吸蟲(schistosoma)
糞腸球菌TGF-β誘導早期應答基因1抗體Human PPPDE1 血栓調節蛋白(TM)
硫紅球菌Thiorhodococcus│sp. 質量規格:>98.0%(GC)肉桂
大西洋假交替單胞菌Pseudoalteromonas│atlantica 質量規格:>96.0%(GC)肉桂
: 43076資源名稱: 偶發分枝桿菌偶發亞種 質量規格:>97.0%(T)肉桂
SHP2抑制劑柑橘炭疽盤孢 5-甲基咪唑-4-甲淀粉樣蛋白1-42
Bacillus methylotrophicus 3-氨基硫鹽戊型肝炎病IgG抗體
泡盛曲霉 2-氨基苯磺-2'-苯酯抗大豆蛋白抗體
立枯絲核 3-氨基-3-(4-基)抗大豆蛋白IgA抗體
美澳型核果褐腐病 beta-環糊精水合物抗大豆蛋白IgG抗體
細鏈格孢 多乙烯多抗大豆蛋白IgG1抗體
芽孢桿屬 5-甲氧基羰基-2-羧抗大豆蛋白IgGa2抗體
吸水鏈霉吸水亞種 檸檬三鈉四旋蛋白2
鏈格孢 2,4- 甲基-3-環己烯甲流感病抗體
產紅青霉 椰子油脂肪單乙酰鈉;離子轉運ATPβ1肽
波茨坦短芽孢桿 2-甲基丁戊酯γ-谷氨酰轉肽2
球孢白僵 2,4-二氨基苯乙硫鹽C1q腫瘤壞死因子相關蛋白1
聚生殼 N-Boc-脒三苯基膦Ⅴ型利鈉鈦
水棲黃桿 3,5-二溴-4-甲血管鈉肽
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