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| 貨號 | FS-X10706 |
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產品介紹:
Parthenolide是一種NF-κB抑制劑，可降低組蛋白脫乙酰酶1(HDAC-1)和DNA甲基轉移酶1。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！ 號：20554-84-1 別名：(-)-Parthenolide 純度：99.13% 分子量：248.32 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
英文名稱：Parthenolide
產品規格：1mL(10mM)|50mg|100mg|200mg
貨號：FS-X10706
實驗報告：
一、分離與培養： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養； 5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；
5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
白布勒酵母轉錄因子E2F-4抗原Anti-CHD4 Antibody人干擾調節因子(IRF)
多粘類芽孢桿菌轉錄因子E2F-6抗原Anti-CHP2 Antibody人干擾調節因子(IRF)
新疆鹽地桿菌屬E2 tag多肽抗原Anti-CHPF Antibody人淋巴β(LTB)
葡萄球菌膠質谷運載蛋白3抗原Anti-CHPF2 Antibody人淋巴β(LTB)
假單胞菌屬EB病編碼核蛋白-3Anti-CHPF2 Antibody人淋巴α(LTA)
弗雷克氏志賀氏菌內皮轉化1抗原Anti-CHPF Antibody人淋巴α(LTA)
球毛殼內皮轉化2抗原Anti-CHRD Antibody人CC趨化因子受體1(CCR1)
圍小叢殼菌嗜性粒陽離子蛋白抗原Anti-CHRNA10 Antibody人CC趨化因子受體1(CCR1)
蘇云金芽胞桿菌外胚層發育不良抗原Anti-CHRAC1 Antibody人CX3C趨化因子受體1(CX3CR1)
海洋交替赤桿菌類表皮生長因子域7抗原Anti-CHRNA9 Antibody人CX3C趨化因子受體1(CX3CR1)
假單胞菌早期反應基因-1/應急反應生長基因1抗原Anti-CHRM5 Antibody人肺部活化調節趨化因子(PARC/CCL18)
蘋果殼囊孢磷化eIF-4E（Ser209）抗原Anti-CHRNA3 Antibody人肺部活化調節趨化因子(PARC/CCL18)
枯草芽孢桿菌轉錄因子ELK1抗原Anti-CHRNE Antibody人黏膜地址黏附分子(MAdCAM-1)
釀酒酵母彈性蛋白抗原Anti-CHST10 Antibody人黏膜地址黏附分子(MAdCAM-1)
薛瓦酵母ELAVL1/HuR多肽抗原Anti-CHST10 Antibody人β干擾(IFN-β/IFNB)
釀酒酵母表皮膜蛋白1抗原Anti-CHST13 Antibody人β干擾(IFN-β/IFNB)
妊娠相關血漿蛋白A2抗體產氣莢膜梭菌人急性淋巴細胞白血病T淋巴細胞
血漿谷羧肽抗體弗氏檸檬桿菌犬癌細胞
PAP-α/β/γ/多聚合α/β/γ抗體嗜熱脂肪芽孢桿菌人腦血管平滑肌細胞
纖溶相關蛋白B2抗體乙鈣不動桿菌人纖維肉瘤
NF-κB抑制劑(Parthenolide)宛氏擬青霉 2-乙酰I型膠原
植物乳桿 2-甲基乙酰苯酮Periostin
桔青霉 2-甲甲酯苯磺酰P物質
玫瑰產色鏈霉 2-溴均三α干擾
多粘類芽孢桿 五甘單芐基α酮戊二脫氫
礦泉水中砷質控樣品 2-溴間二甲苯β2微球蛋白
肺炎克雷伯氏 甲基糠基二硫β干擾
鴨艾美耳球蟲 1-溴-2-萘γ干擾
黑曲霉 4-丁氧基苯甲癌胚抗原
灰樹花 2-氨基-4--6-甲氧基嘧啶白三烯C4
糙孢籃狀 9-溴菲白介1
哈茨木霉 2,3,4-氧基白介10
松口蘑 N-Boc-乙二白介17
小白側耳 乙酰溴-α-D-葡萄糖白介18
地衣芽孢桿 4-甲氧基苯基白介1β
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