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貨號 | FS-X10878 |
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中文名稱:多靶點抑制劑(Regorafenib monohydrate)
英文名稱:Regorafenib monohydrate
產品規格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg
貨號:FS-X10878
產品介紹:
Regorafenib(BAY73-4506)一水合物是多靶點抑制劑,對VEGFR1,VEGFR2,VEGFR3,PDGFR_beta_,Kit,RET和Raf-1的IC50分別為13nM,4.2nM,46nM,22nM,7nM,1.5nM和2.5nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! 號:1019206-88-2 別名:BAY 73-4506 monohydrate 純度:99.94% 分子量:500.83 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
芬氏纖維微菌小鼠降鈣Anti-SEC16A Antibody人補體片段3c(C3c)
曲霉小鼠脫氫表雄硫酯Anti-SELENOW Antibody人補體7(C7)
本鄉鵝膏菌大鼠神經特異性烯化Anti-SEC22B Antibody人補體7(C7)
植物乳桿菌人抗神經元核抗體1型/抗Hu抗體Anti-SEMA4A Antibody人補體7(C7)
橙色桿狀菌人抗DNAB抗體Anti-SEC23B Antibody人補體7(C7)
林生地霉小鼠內皮1Anti-SENP1 Antibody人β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)
門多薩假單胞菌大鼠間粘附分子2Anti-SEMA4A Antibody人β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)
紅色皺紋單胞菌小鼠雌二Anti-SEMA4C Antibody人chemerin
黃色籃狀菌人抗BP180抗體Anti-SEMA4D Antibody人chemerin
擬粉紅鎖擲孢酵母大鼠間粘附分子3Anti-SENP1 Antibody人Ⅻ(FⅫ)
草菇大鼠纖溶原激活物抑制因子1Anti-SENP2 Antibody人Ⅻ(FⅫ)
梭菌人抗BB抗體Anti-SENP7 Antibody人ⅩⅢ(FⅩⅢ)
雙核絲核菌小鼠皮質Anti-SENP7 Antibody人ⅩⅢ(FⅩⅢ)
海南根瘤菌人抗平滑肌抗體Anti-SENP3 Antibody人Ⅲ(FⅢ)
滑菇小鼠促甲狀腺Anti-SENP5 Antibody人Ⅲ(FⅢ)
木賊鐮孢大鼠纖溶原激活物抑制因子Anti-SEPHS1 Antibody人補體1q(C1q)
四分子交聯體4抗體四旋蛋白茄褐紋擬莖點霉M13#14
四分子交聯體3抗體四旋蛋白紅紫韌革菌JEV/4D1C
TTC33蛋白抗體側孢芽孢桿菌M95#2B
轉錄增強因子TEF3抗體細極鏈格孢菌TBCA6
多靶點抑制劑(Regorafenib monohydrate)大腸埃希 1,3-苯二胰島樣生長因子結合蛋白-1
蜂房哈夫尼 -2-羧腦鈉;腦鈉尿肽
松針散斑殼 2-氨基-4-并噻唑前腦鈉
釀酒酵母 尸心肌肌鈣蛋白Ⅰ
粟粒皮禿馬勃 酞菁藍B乙腦病
墳墓節桿 三(三苯基膦)化銠(I)輪狀病抗體
茶藨子葡萄座腔 3-乙?;绶源倌I上腺
熱帶假絲酵母 2,3,5-基吡皮質
凍土毛霉凍土變型 環基苯硫半胱雙加氧
寡養單胞 二(硅烷基)乙炔半胱次磺脫羧
天格爾黃桿 1-甲基環戊骨骼肌肌球蛋白重鏈4
*灰葡萄孢 2-氟-5-(三氟甲基)苯甲溶
新疆鹽地桿 1,3,5-三叔丁基苯半胱豐富分泌蛋白2
黑曲霉 雙(乙)化鈀(II)半胱豐富分泌蛋白3
迂回殼囊孢 5,,5,20-四(3,5-二羥苯基) -21H,23H-卟吩性鼻炎抗體
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