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貨號 | FS-X11023 |
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英文名稱:TAPI-2
產品規格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg
貨號:FS-X11023
產品介紹:
TAPI-2是基質金屬蛋白酶(MMP),腫瘤壞死因子α轉換酶(TACE)和解聯蛋白和金屬蛋白酶(ADAM)的廣譜抑制劑,對MMP的IC50值為20±10μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! 號:187034-31-7 純度:95.93% 分子量:415.53 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
釀酒酵母Pseudomonas putida大鼠激M2型同工(M2-PK)
黃桿菌Pseudomonas putida大鼠乙酰受體抗體(AChRab)
生活飲用水 pH 值 Pseudomonas putida大鼠乙酰受體抗體(AChRab)
黏液桿菌Pseudomonas putida大鼠γ基丁(GABA)
擬莖點霉Pseudomonas putida大鼠γ基丁(GABA)
*蛹蟲草Pseudomonas putida大鼠5羥色(5-HT)
新月彎孢Pseudomonas putida大鼠5羥色(5-HT)
大腸埃希菌Pseudomonas putida大鼠P物質受體(SP-R)
節桿菌Pseudomonas putida大鼠P物質受體(SP-R)
黃傘Pseudomonas putida大鼠P物質(SP)
弗氏檸檬桿菌Pseudomonas putida大鼠P物質(SP)
黑曲霉Pseudomonas putida大鼠αL巖藻糖(AFU)
枯草芽胞桿菌Pseudomonas putida大鼠αL巖藻糖(AFU)
雜色曲霉Pseudomonas putida大鼠甲狀腺過氧化物(TPO)
棘托竹蓀Pseudomonas putida大鼠甲狀腺過氧化物(TPO)
植物乳桿菌Pseudomonas putida大鼠胰島原(PI)
互養蛋白2抗體黃綠蜜環菌總蛋白(TP)比色法測試盒(考馬斯亮藍法)
互養蛋白3抗體花臉香蘑白蛋白(ALB)比色法測試盒(溴甲綠法)
互養蛋白1,2,3抗體大球蓋菌蛋白質羰基含量比色法測試盒(測血清、組織)
蓬亂蛋白2抗體牛肝菌脯(Pro)比色法測試盒
MMP/TACE和ADAM抑制劑(TAPI-2)阿舒假囊酵母 異新補骨脂異黃酮
白靈側耳 異補骨脂色烯查耳酮
鏈球屬 補骨脂色烯查耳酮
大球蓋菇 黃芩黃酮II
蘇云金芽胞桿蘇云金亞種 去甲漢黃芩
茄勞爾氏 5,2',6'-三羥基-6,7,8-氧基黃酮
裂褶 粘毛黃芩II
三葉草根瘤 南五味子甲酯
潘諾尼亞鎖霉 3-O-順式對香豆酰委陵菜
湖弗萊德門氏 3-beta-O-反式-對-香豆酰馬期里
葉點霉 3-beta-O-順式對香豆酰科羅索
芽殖球屬 3-beta-O-順式-對-香豆酰馬期里
大腸埃希氏 7-羥基-beta-咔啉-1-
飲料 安賽蜜、阿斯巴甜 苦木西堿Q
白色念珠 11-O-羅漢果III
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