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貨號 | FS-X10880 |
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產品介紹:
CPI-203是一種有效的,選擇性的,細胞通透的BET bromodomain抑制劑,IC50值約為37nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! 號:1446144-04-2 純度:99.38% 分子量:399.9 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
中文名稱:BET bromodomain抑制劑(CPI-203)
英文名稱:CPI-203
產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg
貨號:FS-X10880
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
蠟狀芽孢桿菌小鼠糖原磷化同工IIAnti-SERINC1 Antibody人血清淀粉樣蛋白P(SAP)
解淀粉芽孢桿菌解淀粉亞種人抗磷脂抗體Anti-SERINC2 Antibody人甘露糖凝集受體(MBLR)
氣傳原小單孢菌小鼠糖原磷化同工MMAnti-SERINC3 Antibody人甘露糖凝集受體(MBLR)
棒彎孢大鼠Ⅲ型膠原Anti-SERPINB12 Antibody人纖溶/纖維蛋白溶(PL/Fbn)
禽腦脊髓炎病人抗組蛋白抗體Anti-SERPINA11 Antibody人纖溶/纖維蛋白溶(PL/Fbn)
硝鹽還原菌抗髓鞘少樹突膠質糖蛋白(人)Anti-SERINC3 Antibody人B受體(BCR)
大腸埃希氏菌人晶體蛋白αAnti-SERPINA1 Antibody人B受體(BCR)
孢曲霉大鼠C反應蛋白Anti-SERPINB3 Antibody人表面膜免疫球蛋白M(mIgM)
構巢曲霉小鼠糖原磷化同工BBAnti-SERPINB4 Antibody人表面膜免疫球蛋白M(mIgM)
枯草芽孢桿菌大鼠組織多肽抗原Anti-SERPINE1 Antibody人表面膜免疫球蛋白D(mIgD)
白囊耙齒菌小鼠甲狀腺抗體Anti-SERPIND1 Antibody人表面膜免疫球蛋白D(mIgD)
戊糖乳桿菌人晶體蛋白βAnti-SESN1 Antibody人殺傷免疫球蛋白樣受體(KIR)
豬鏈球菌人抗膠原蛋白抗體Anti-SERPING1 Antibody人殺傷免疫球蛋白樣受體(KIR)
黑曲霉大鼠組織型纖溶原激活劑Anti-SETDB2 Antibody人殺傷凝集樣受體(KLR)
乳酒假絲酵母小鼠抗促甲狀腺受體抗體Anti-SF3B6 Antibody人殺傷凝集樣受體(KLR)
Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum小鼠兒茶Anti-SESN1 Antibody人活化蛋白C(APC)
p53誘導蛋白5抗體虎掌菌15B8
UNC80蛋白抗體丁香假單胞桿菌番茄致病變種19A4
突觸融合蛋白結合蛋白5抗體葡萄生鏈格孢TBEF3
β-taxilin蛋白抗體樺褐孔菌6B8D11H12
BET bromodomain抑制劑(CPI-203)金針菇(毛柄、冬菇) 三氟磺鈧纖維
克魯斯假絲酵母 糠基硫中性蛋白
魚肉 總孔雀石綠、結晶紫 N-(9-芴甲氧羰基)-N1-叔丁氧羰基-L-色磷脂A2
小孔屬 2--3-甲基噻吩胰島生長因子2
氧化黃色桿 四乙二二甲胰島樣生長因子結合蛋白3
蠟狀芽孢桿 二乙基二硫代鋅α半乳糖基抗原
繩狀籃狀 二已A型口蹄疫
巨孢毛霉 十二烷口蹄疫A型抗原
檸檬綠木霉 1-癸硫因子信號轉導抑制因子3
尖孢鐮孢 甲基烯月桂酯因子信號轉導抑制因子1
果生鏈核盤 乙酰酮錳(III)骨鈣
尖鐮孢 2-溴-3-甲基噻吩二氧化
大腸埃希氏桿 2-氟-4-硝苯球蛋白
鏈格孢 5-戊炔氨基轉移
靈芝 雙(三苯基膦)化鎳天門冬氨基轉移
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