梦入神机,梦入神机,穿越小说排行榜

貨號	FS-X10302

培養操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；

5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

中文名稱：DNA合成抑制劑(Gemcitabine)

英文名稱：Gemcitabine

產品規格：1mL(10mM)|100mg|200mg|500mg|1g

貨號：FS-X10302

產品介紹:

英文名稱：Gemcitabine

產品規格：1mL(10mM)|100mg|200mg|500mg|1g

Gemcitabine是一種DNA synthesis抑制劑，作用于BxPC-3，Mia Paca-2，PANC-1，PL-45和AsPC-1細胞，IC50分別為37.6，42.9，92.7，89.3和131.4nM。

注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！

號：95058-81-4

別名：NSC 613327;LY188011

純度：98.0%

分子量：263.2

儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

豬丹絲菌Ki67蛋白抗體Human PLCD3 銜接蛋白活化因子1(APAF1)

釀酒酵母離子通道蛋白EAG1抗體Human PLCD4 酰基化饑餓(AG)

蘇云金芽胞桿菌轉染抑癌基因KLF6抗體Human Plexin B2 酰化激蛋白(ASP)

盤長孢狀盤孢KLF樣轉錄因子8抗體Human PLCH1 纖維母生長因子受體1癌基因伴侶(FGFR1OP)

枯草芽孢桿菌胞質接頭蛋白Keap1抗體Human PLCL2 纖維母表面抗原(FSP)

異常漢遜酵母磷化腸道內富含的Kruppel樣因子5抗體Human PLCD4 纖維連接相關抗原(FRA)

枯草芽孢桿菌磷化抑癌蛋白EZH2抗體Human Plexin B2 纖維連接蛋白(FN)

大腸埃希菌AEG-1抗體Human PLCH1 纖維介蛋白(fgl2)

桔青霉白介6抗體Human PLCL2 纖維膠凝蛋白3(FCN3)

小單孢菌低密度脂蛋白抗體Human PLCH1 纖維蛋白原降解產物(FDP)

LRRC19蛋白抗體Human PLCL2 纖維蛋白原α鏈(FGA)

麥根腐平臍蠕孢層粘連蛋白受體1單克抗體Human PLA2G4F 纖維蛋白原(Fb)

粉紅鐮刀菌層粘連蛋白受體1單克抗體Human PLA2G4E 纖維蛋白溶(PL/Fbn)

盔形畢赤酵母T活化連接蛋白抗體Human PON3(Serum paraoxonase/lactonase 3) 纖維蛋白(Fibrin)

弗雷德里克斯堡假單胞菌LIX1抗體Human PLAC1L 纖調蛋白(FMOD)

單格孢屬凝集樣氧化型低密度脂蛋白受體抗體Human PLAGL2 纖溶抑制因子/凝血激活的纖溶抑制物(TAFI)

蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質量規格：>98.0%(HPLC)(T)白樺脂

球孢白僵菌Beauveria│bassiana 質量規格：>95.0%(HPLC)(T)棗仁皂D

玉蜀黍赤霉（麥類赤霉病菌）Gibberella│zeae 質量規格：>98.0%(HPLC)棗仁皂B
DNA合成抑制劑(Gemcitabine)葡萄座腔 6-甲氧基苯并噻唑草

釀酒酵母 1-(3-基)-哌（易）隱孢子蟲

Sphingomonas desiccabilis 2,4-二苯基咪唑胃泌釋放肽前體

粘著劍 2-溴-6-甲氧基苯并噻唑脲

枯草芽胞桿 2-吡甲神經鞘磷脂

謝瓦散囊 2-氨基-5-甲氧基法尼基轉移

藤倉赤霉 3-羥基-4-甲氧基甲酯磷脂A2

枯草芽孢桿 3-氨基-6--4-高分子脂聯

*灰葡萄孢 2--5-基-3-法尼基轉移β

假諾卡氏葡萄糖鈣一水合物法尼基轉移α

加納鏈霉 4,4-二甲基-2-吡咯烷酮肽基精脫亞氨

尖孢鐮刀二苯并噻吩-2-非磷化酮脫氫

新城疫病 2-吡啶-5-磺酰新蝶呤

殼蕉孢 2-吡啶-3-磺酰酰基結合蛋白
操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)