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CSP共價結合型果膠可見分光光度法

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產品型號

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所  在  地上海市

更新時間:2022-04-12 16:32:33瀏覽次數:210次

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貨號 FS-01S63885
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產品名稱:CSP共價結合型果膠可見分光光度法

規(guī)格:50管/24樣

檢測方法:可見分光光度法

貨號:FS-01S63885

商品介紹:

測定意義

果膠是構成細胞初生壁和中膠層的主要成分,主要由原果膠、果膠酸甲酯和果膠酸組成。果膠中含有半乳糖醛酸、乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸等,是許多高等植物細胞壁中含量豐富的多糖成分,其*的物理、化學性質影響著植物源食品的口感和品質。果膠間以Ca2+橋及其他離子鍵、氫鍵、糖苷鍵、酯鍵和苯環(huán)偶聯的方式交聯,通過不同的抽提方法可以提取各種形式的果膠,如水溶性果膠(WSP)、離子結合型果膠(ISP)和共價結合果膠(CSP)。

測定原理:

利用帶有螯合劑的堿溶液提取共價結合型果膠(CSP),采用咔唑比色法測定果膠含量。果膠水解成半乳糖醛酸,在硫酸溶液中與咔唑試劑進行縮合反應,生成物質在530 nm處有最大吸收峰。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計、水浴鍋、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、80%乙醇、丙酮、濃硫酸(不允許快遞)、研缽和蒸餾水。

操作步驟:

實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。

1.        加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8.       用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。

粗酶液提取:

1、細胞或組織樣品的制備:

培養(yǎng)細胞:先收集細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細胞數量(104個):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1ml提取液),超聲波破碎細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

2、血清(漿)樣品:直接檢測。

試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;

試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;

試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;

試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;

試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
ACD  腎上腺皮質發(fā)育異常蛋白抗體    * 0.2ml

ACHE/Acetylcholinesterase  乙酰膽抗體    * 0.1ml

Acinus  Acinus抗體    * 0.2ml

phospho-Acinus(Ser1180)  磷化腺泡Acinus蛋白抗體    * 0.1ml

Ack1  醋激1抗體    * 0.2ml

Phospho-Ack1(Tyr859/860)  磷化Ack1抗體    * 0.1ml

Phospho-Ack1(Tyr284)  磷化Ack1抗體    * 0.1ml

Phospho-Ack1(Tyr326)  磷化Ack1抗體    * 0.1ml

ACSL1  長鏈脂肪A連接1/2抗體    * 0.2ml

ACTH (1-39)  促腎上腺皮質(1-39)抗體    * 0.1ml

Phospho-MKP1 (Ser318)  磷化絲裂原活化蛋白激磷1抗體    * 0.1ml

ACTH (18-39)  促腎上腺皮質ACTH(18-39)抗體    * 0.1ml

ACTH (7-23)  促腎上腺皮質ACTH (7-23)抗體    * 0.1ml

Actin α/alpha-SMA  肌動蛋白α(α-SMA)抗體    * 0.1ml

Sarcomeric Alpha Actinin/ACTN2  α橫紋肌輔肌動蛋白/α-SCA抗體    * 0.1ml
CSP共價結合型果膠可見分光光度法亞油鈉 95%豐度:98atom%;化學純度:≥98%VEGF(Human Vascular Endothelial cell Growth Factor) ELISA KIT  人血管內皮生長因子

海帶多糖  ≥96%(HPLC)豐度:99atom%;化學純度:≥98%VCAM-1/CD106(Human Vascuolar cell adhesion molecule 1) ELISA kit  人血管內皮粘附分子1

甲基烯月桂酯 96%尿-15N2 豐度:10atom%;化學純度:≥98.5%sTRAIL(Human soluble tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand) ELISA KIT  人可溶性腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體

二十甲酯 98% (GC)尿-15N2 豐度:99atom%;化學純度:≥98.5%TRAIL-R4(Human tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 4) ELISA Kit  人腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體4

甲酯 75.0% (GC)豐度:99atom%;化學純度:≥98.5% TRAIL-R3(Human tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 3) ELISA Kit  人腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體3

甲基環(huán)戊烷 98%豐度:10atom%;化學純度:≥98.5% TRAIL-R1(Human tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 1) ELISA Kit  人腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體1

2-甲氧基-5-磺酰甲甲酯 98%豐度:10atom%;化學純度:≥98%TNF- Beta(Human Tumor necrosis factor Beta) ELISA KIT  人腫瘤壞死因子β

-8-甲基-6-壬酰氯 97%豐度:99atom%;化學純度:≥98% TNF- Alpha(Human Tumor necrosis factor Alpha) ELISA KIT  人腫瘤壞死因子α

 


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