當前位置:上海撫生實業有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>人ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TIL-17人白介素17ELISA試劑盒實驗原理
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
產品名稱 | IL-17人白介素17ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human Interleukin 17, IL-17 Elisa Kit |
貨號 | FS-H63250 |
公司“質量是企業是生命之源”,選購優勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質金屬蛋白酶等等?
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
Staphylococcuscapitissubsp.urealyticus 頭葡萄球菌解脲亞種Staphylococcuscapitissubsp.urealyticus分離基物:人體皮膚安全等級:1109生長條件:37℃ 純度:98%
Fusariumequiseti 木賊鐮孢Fusariumequiseti分離基物:花菜籽安全等級:1模式菌株:no轉化甾體激素14,17生長條件:25~28℃ 純度:98%
Amycolatopsisdecaplanina AmycolatopsisdecaplaninaAmycolatopsisdecaplanina分離基物:土壤安全等級:1模式菌株:no158生長條件:28℃ 純度:98%
Amycolatopsiskeratiniphilasubsp.keratiniphila Amycolatopsiskeratiniphilasubsp.keratiniphilaAmycolatopsiskeratiniphilasubsp.keratiniphila分離基物:土壤安全等級:1模式菌株:no158生長條件:28℃ 純度:98%
Micromonosporaechinospora 棘孢單胞菌Micromonosporaechinospora安全等級:1模式菌株:no產慶大霉素,限制性內切酶MecI159160生長條件:28℃ 純度:98%
Streptomycesmacrosporus 大孢鏈霉菌Streptomycesmacrosporus安全等級:1模式菌株:no158生長條件:37℃ 純度:98%
Streptomycesviolaceoruber 紫紅鏈霉菌Streptomycesviolaceoruber分離基物:土壤安全等級:1模式菌株:no130生長條件:28℃ 純度:97%
Armillariella│gallica 法國蜜環菌Armillariella│gallica斜面培養物安全等級:1模式菌株:no食用,藥用。CM0017生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;定期移植法 純度:98%
IL-17人白介素17ELISA試劑盒實驗原理綠膿菌素測定培養基間充質干脂肪分化培養基腸平滑肌AQP9(aquaporin Protein-9) 水通道蛋白-9抗原 (多肽抗原)
乳糖膽鹽培養基間充質干軟骨分化培養基結腸平滑肌Leptin 瘦素(多肽抗原)
乳糖膽鹽培養基上皮培養基直結腸平滑肌Leptin receptor(long) 瘦素受體(長)(抗原)
HC瓊脂基礎內皮生長添加物腸粘膜上皮phospho-AR/androgen receptor( p-Ser580)peptide 雄激素受體(多肽)
改良LETHEEN瓊脂基礎平滑肌生長添加物結腸粘膜上皮MAPK-1/2 絲裂原活化蛋白激酶(抗原)
TAT肉湯基礎平滑肌生長添加物-無血清直腸粘膜上皮MAPKK2 絲裂原活化蛋白激酶激酶
真菌培養基周生長添加物肝內膽管上皮M2-PK ( pyruvate Kinase M2) 丙激酶-M2(抗原)
酵母浸出胨葡萄糖培養基(YPD)腦膜生長添加物肝實質M2-PK ( pyruvate Kinase M2 ) 丙激酶-M2(抗原)
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
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