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實時熒光定量PCR是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務:DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
產品名稱 | 分類 | 貨號 |
鮑曼不動桿菌(AB)核酸檢測試劑盒 | 熒光-PCR法 | FS-P10467 |
PCR技術的定量原理:?
擴增曲線
在Real-time qPCR中,對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應的進行,監測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應過程中產生的DNA拷貝數是呈指數形式增加的,隨著反應循環數的增加,最終PCR反應不再以指數形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產物已不再呈指數級的增加,PCR的終產物量與起始模板量之間無線性關系,所以根據最終的PCR產物量不能計算出初始模板量。
服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存備用。
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
-669℃冰箱凍結;真空冷凍干燥
根瘤菌培養基: 63模式菌株: no珍珠葉相思提供形式: 斜面培養物安全等級: 1生長條件: 28 定期移植法
小單孢菌屬抗細菌;抗金黃色葡萄球菌;抗枯草芽孢桿菌模式菌株: no樹根土提供形式: 斜面培養物安全等級: 1培養基: CM0012生長條件: 35-37C
DSM40194=ATCC23954=CBS937.68=IFO12906=ISPType strain. Produces racemomycine complex, strept模式菌株: yes種屬: Streptomyces│racemochromogenes提供形式: 凍干物安全等級: 1培養基: 0038生長條件: 28℃
禽呼腸孤病研究模式菌株: no鵝提供形式: 凍干物安全等級: 1培養基: 0生長條件: 37
漢遜德巴利酵母近海酵母模式菌株: no生物樣/海藻提供形式: 斜面培養物安全等級: 1培養基: 513生長條件: 28℃
貝倫格葡萄座腔菌梨生專化型培養基: 14模式菌株: no樹皮上小瘤提供形式: 斜面培養物安全等級: 1生長條件: 28 定期移植法
-670℃冰箱凍結;真空冷凍干燥
鏈霉菌屬產生抗腫瘤活性物質模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1培養基: CM0012生長條件: 28C
海假交替單胞菌培養基: 471微生物/耐冷菌;產酶微生物/產bate-半乳糖苷酶水樣/海冰鹵液提供形式: 斜面培養物模式菌株: no生長條件: 15℃ 液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
伊氏利斯特氏菌培養基: 538食品檢驗提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 37℃ 真空冷凍干燥法
產黃青霉培養基: 0013模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 25℃ 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
斯氏假單胞菌在M9培養基中抗普斯特的濃度達500mg/L。模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養物安全等級: 1培養基: 0002生長條件: 30℃
星形斯塔普氏菌潛在石油烴類降解菌/生物活性物質篩選模式菌株: no水樣/上層海水提供形式: 凍干物安全等級: 1培養基: 472生長條件: 25℃
-671℃冰箱凍結;真空冷凍干燥
鏈格孢屬培養基: 14模式菌株: no病葉病斑提供形式: 斜面培養物安全等級: 1生長條件: 25-28 定期移植法
3-基噠嗪鹽鹽 4-硝基乙胺鹽鹽 異丙基溴化
Fmoc-L-4-丙 3-基環己烷 環戊基溴化
3,5-二磺酰 二(2-噻吩基)乙醇東莨菪酯 3-甲基-5-(2-羥基乙基)-4-甲基噻唑啉
2--4-磺酰 N-羥甲基鄰 4-羥基-3-己
Pendimethalin 二甲戊靈 40487-42-1
芐基化 6921-34-2
Chlorotributyltin 三丁基化錫 1461-22-9
Dibutyltin 二丁基馬來錫 28586
大鼠吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)ELISA試劑盒 ,英文名: IDO ELISA Kit
人多免疫球蛋白受體(poly-IgR)ELISA檢測試劑盒Humanpolyimmunoglobulieceptor,poly-IgRELISAKit 96T/48T
大鼠白介素11(IL-11)免疫試劑盒 Rat Ierleukin 11,IL-11 ELISA KIT
CLIAKitfoARC/CCL17ELISAKit大鼠胸腺活化調節趨化因子規格:48T/96T
人體MMP3RFLP基因分析試劑盒20次
ELISAKiNP-Ab人抗核糖核蛋白抗體規格:48T/96T
鮑曼不動桿菌(AB)核酸檢測試劑盒長春質2468-21-5英文名:Catharanthine
英文別名:(+)-3,4-Didehydrocoronaridine
登錄號:2468-21-5
分子式:C21H24N2O2
分子量:336.42
分子結構:
規格:20mg/支
純度:≥ 98%
用途:用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。
提取來源:夾竹桃科植物長春花Catharanthus roseus (L.)G.Don的全草
藥理藥效:止痛、消炎、安眠、通便及利尿等。
貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年
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