當前位置:上海撫生實業有限公司>>細胞生物學試劑>>抑制劑激活劑>> PERK抑制劑(GSK2606414)
貨號 | FS-X10348 |
---|
中文名稱:PERK抑制劑(GSK2606414)
英文名稱:GSK2606414
產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
貨號:FS-X10348
產品介紹:
英文名稱:GSK2606414 產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg GSK2606414是一種具有選擇性的PERK抑制劑,IC50值為0.4nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! 號:1337531-36-8 純度:99.18% 分子量:451.44 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
短密青霉肌球蛋白輕鏈激抗體Human PICP(C-terminal propeptide of Collagen alpha-1(I) chain) 磷化乙酰(PaCoA)
大腸埃希氏桿菌MYCBPAP抗體Human IMPA2(Inositol monophosphatase 2) 磷化腺活化蛋白激(pAMPK)
香菇組織相容性復合體蛋白1抗體Human CARTPT(Cocaine-and amphetamine-regulated transcript protein) 磷化腺活化蛋白激(AMPK)
擴散炭層菌線粒體核糖體蛋白S22抗體Human COL1A1(Collagen Type I Alpha 1) 磷化外信號調節激(pERK)
毛栓孔菌棕櫚酰化膜蛋白7抗體Human PTTG2(Securin-2) 磷化糖原合激3β(pGSK3B)
泡囊短波單胞菌小鼠抗單克抗體Human COL2A1(Collagen alpha-1(II) chain) 磷化糖原合成激3(pGSK-3)
乳乳球菌乳亞種肌球蛋白輕鏈1/3抗體Human PTTG1IP(Pituitary tumor-transforming gene 1 protein-interacting protein) 磷化肌球蛋白輕鏈(PMLC)
葡萄座腔菌屬磷化肌球蛋白輕鏈抗體Human NUSAP1(Nucleolar and spindle-associated protein 1) 磷化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)
大腸埃希菌肌肉特異性泛蛋白連接1抗體Human OxLDL(Oxidized low-density lipoprotein) 磷化蛋白激C(P-PKC)
產氣列契瓦尼爾氏菌泛蛋白連接抗體Human PIIINP(N-terminal propeptide of Collagen alpha-1(III) chain) 磷化蛋白激B(P-PKB)
大腸埃希菌單羧轉運蛋白2抗體Human MYOCD(Myocardin) 磷化cAMP反應元件結合蛋白1(pCREB1)
芬尼青霉可溶性蘋果脫氫抗體Human NRN1(Neuritin) 磷甘油變位2(PGAM2)
云芝栓孔菌(變色栓菌)蛋白激C亞性D型抗體Human MITF(Microphthalmia-associated transcription factor) 淋巴趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)
枝孢屬磷化µ-型阿片受體抗體Human LMAN2(Vesicular integral-membrane protein VIP36) 淋巴抗原6復合物基因座A(Ly6a)
鏈霉菌磷化絲裂原活化蛋白激激1/2抗體Human MDH2(Malate dehydrogenase, mitochondrial) 淋巴功能相關抗原3(LFA-3/CD58)
釀酒酵母基質金屬蛋白9抗體Human MMP17(Matrix metalloproteinase-17) 淋巴功能相關抗原2(LFA-2/CD2)
美澳型核果褐腐病菌Monilinia│fructicola (G. Winter) Honey 質量規格:>98%,BR鹽甜菜堿
淡紫擬青霉(新引種)Paecilomyces lilacinus 質量規格:粘度100000mPa.s甜菜堿
: SK1023/61資源名稱: 坎德拉沙門氏菌 質量規格:4000mPa.s,BR鼠李糖
PERK抑制劑(GSK2606414)竹喙球 2-硝基乙降鈣基因相關肽
枯草芽胞桿 (S)-1-叔丁氧羰基-3-氨基降鈣受體
產黃青霉 巴豆酰降鈣受體樣受體
黑蔥花霉 (-)二異松蒎基烷降鈣原
蘇云金芽孢桿 3-戊烯-2-酮膠原Ⅲ
棘孢曲霉 甲酰肼膠原I
金龜子綠僵 2--3-三氟膠原II
香菇 D-葡萄庚糖膠質系來源的神經營養因子
Talaromyces macrosporus 4-正基乙炔角蛋白15
大腸埃希氏 乙乙酯角化生長因子
香菇 2-甲基-2-戊烯結締組織生長因子
葡萄座腔 O-甲基-L-酪結構型一氧化氮合
毛柄(金針菇) 4-乙苯結合珠蛋白
白假絲酵母 4-乙氧基睫狀神經營養因子
紅曲霉 甲基-PEG4-NHS酯解偶聯蛋白1
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業自行提供,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業負責,儀表網對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規避購買風險,建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。