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Wip1磷酸酶抑制劑(GSK 2830371)

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產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-20 16:46:12瀏覽次數:169次

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貨號 FS-X10684
Wip1磷酸酶抑制劑(GSK 2830371)正在熱銷的產品:VEGF-R2 小鼠血管內皮生長因子受體2Symbol 采集器 MC3000 主機 電池 數據線
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產品介紹:

GSK2830371是一種選擇性的Wip1磷酸酶(Wip1phosphatase)抑制劑,IC50為6nM。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途!

號:1404456-53-6

純度:98.94%

分子量:461.02

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

中文名稱:Wip1磷酸酶抑制劑(GSK 2830371)

英文名稱:Wip1phosphatase Inhibitor

產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg

貨號:FS-X10684

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

嗜中溫寒冷桿菌艾滋病病(抗原)Anti-B4GALT3 Antibodyβ-羥丁(OHβ)

解脂亞羅酵母熱休克蛋白-60(抗原)Anti-B4GALT1 Antibodyβ-內啡肽(βEP)

Mucor ardhlaengiktus熱休克蛋白-70(多肽抗原)Anti-B4GALT3 Antibodyβ-骨膠原交聯(βCTx)

寬被多年臥孔菌銜接蛋白α抗原Anti-B4GALT5 Antibodyβ-促脂(βLPH)

白鬼筆Caspase 激活的脫氧核糖核抑制劑(抗原)Anti-BACH2 Antibodyβ2-微球蛋白(β2M)

釀酒酵母胰島降解(抗原)Anti-BAG1 Antibodyβ-1,4-半乳糖轉移1(β4GALT1)

葡萄牙棒孢酵母人胰島樣生長因子-I受體Anti-BAG4 Antibodyβ-1,4-N-乙酰半乳糖基轉移2(β4GALNT2)

需鈉弧菌胰島樣生長因子結合蛋白-5(抗原)Anti-BAGE2 Antibodyβ-1,3-葡糖基移1(β3GAT1)

斑玉蕈胰島(抗原)Anti-BAIAP2L1 Antibodyα-血紅蛋白穩定蛋白(αHSP)

根瘤菌APC活化蛋白C抗原Anti-BAGE3 Antibodyα-乳清蛋白(αLA)

假單胞菌屬脂肪炎癥因子Apelin抗原Anti-BAGE4 Antibodyα-內啡肽(αEP)

巨大芽胞桿菌Apelin receptor抗原Anti-BAIAP2L1 Antibodyα-黑色激(αMSH)

嗜松青霉APG4B自噬相關抗原Anti-BAIAP2L1 Antibodyα-骨膠原交聯(αCTx)

釀酒酵母載脂蛋白A1抗原Anti-BAIAP2L2 Antibodyα-胞襯蛋白(SPTAN1)

黑曲霉凝聚α/β抗原Anti-BAIAP2L2 Antibodyα白蛋白(AFM)

運動發酵單孢菌胰島受體-α(抗原)Anti-BAK1 Antibodyα2-纖溶抑制因子(α2PI)

磷相互作用結構域蛋白1抗體Lysobacterdaejeonensis人正常結腸細胞

磷脂磷2結構域3抗體蘑菇假單胞菌急性髓系細胞白血病細胞

石骨癥相關蛋白PLEKHM1抗體過渡原囊菌人骨髓基質細胞

血小板白細胞C激底物同源結構域M2抗體丁梭菌小鼠單核細胞巨噬細胞
Wip1磷酸酶抑制劑(GSK 2830371)黑曲霉 (2S)-(+)-縮水甘油基對甲苯磺酯P53蛋白

粘質沙雷氏 2--1,10-鄰二氮雜菲誘導骨髓白血病分化蛋白Mcl-1

褶皺曲霉 2-(三氟甲基)芐基二B瘤-XL

產灰色鏈霉 L-蘇糖鈣熱休克轉錄因子

枯草芽孢桿 D-蘋果二甲酯球蛋白E

檸條根瘤 3,3-二甲基丁酰核糖核

檸檬兩面神 三(3,6-二氧雜庚基)脫氧核糖核I型

粉紅聚端孢霉 2-甲基-2-金剛烷核糖核A型

松杉靈芝 2--5-Toll樣受體2

雙孢蘑菇 4-甲氧基苯乙Toll樣受體4

雙孢蘑菇 3-環己基過氧化還原2

榛針孢酵母 5-氟-1-茚酮12羥二十碳四烯

平菇—465 2-氟腺白介18

玫瑰單胞 五酮

糙皮側耳 3-甲乙酰乙

 


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