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貨號	FS-X11031

培養操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；

5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

中文名稱：p38抑制劑(SB-366791)

英文名稱：SB-366791

產品規格：1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg

貨號：FS-X11031

產品介紹:

SCIO-469是p38選擇性的ATP競爭抑制劑，IC50值是9nM.

注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！

號：472981-92-3

純度：98.01%

分子量：287.74

儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

魚肉總孔雀石綠、結晶紫Pseudomonas corrugata大鼠抗凝血Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)

小孔菌屬Staphylococcus warneri大鼠神經肽Y(NP-Y)

氧化黃色桿菌Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis大鼠神經肽Y(NP-Y)

蠟狀芽孢桿菌Pseudomonas corrugata大鼠生長激釋放多肽(GHRP)

繩狀籃狀菌Lactobacillus rhamnosus大鼠生長激釋放多肽(GHRP)

巨孢毛霉Lactobacillus fermentum大鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)

檸檬綠木霉Enterococcus faecalis大鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)

尖孢鐮孢Leuconostoc lactis大鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)

果生鏈核盤菌Leuconostoc mesenteroides subsp. mesenteroides大鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)

尖鐮孢Enterococcus faecium大鼠血栓前體蛋白(TpP)

大腸埃希氏桿菌Enterococcus cecorum大鼠血栓前體蛋白(TpP)

鏈格孢Enterococcus hirae大鼠抑制B(INH-B)

靈芝Leuconostoc mesenteroides subsp. dextranicum大鼠抑制B(INH-B)

釀酒酵母Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis大鼠胰島受體β(ISR-β)

枯草芽孢桿菌Halorubrum saccharovorum大鼠胰島受體β(ISR-β)

意大利青霉Haloferax mediterranei大鼠糖化血紅蛋白A1c(A1c)

突觸抗體/突觸相關蛋白-1肺形側耳(秀珍菇)低密度脂蛋白膽固(LDL-C)比色法測試盒(雙試劑直接法)

分泌抗體離褶傘植物抗逆性植物抗逆性植物抗逆性植物抗逆性植物抗逆性

子宮內膜抗體白鬼傘植物類黃比色法測試盒

碳氫鈉協同轉運蛋白4-A4抗體叢生地星植物總比色法測試盒
p38抑制劑(SB-366791)漢遜德巴利酵母寶藿V

焦曲霉二氫大豆

枯草芽孢桿續斷A

茯苓表戈辛O

葫蘆細基格孢 6-基異麥冬黃烷酮A

紙細基格孢焦地黃苯乙甙B1

假單胞苞菊甙

Parablastomonas 蘆薈新甙D

枯草芽孢桿羅漢松樹脂-4'-O-β-龍膽二糖

地尿芽孢桿硫天仙子水合物

根瘤 5,7,4'-三羥基-8-甲基二氫黃酮

枯草芽孢桿偏諾皂元

嗜鞣管囊酵母偽原皂Pa

路德類酵母原皂Pa

灰樹花1 6-甲氧基-7-0-beta-D-吡喃葡萄糖
操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)