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| 貨號 | FS-X10522 |
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產品介紹:
英文名稱：JNK-IN-8 產品規格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg JNK-IN-8是一種有效的JNK抑制劑，抑制JNK1，JNK2和JNK3，IC50分別為4.7nM，18.7nM和1nM。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！ 號：1410880-22-6 純度：99.83% 分子式：C??H??N?O? 分子量：507.59 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
中文名稱：JNK抑制劑(JNK-IN-8)
英文名稱：JNK-IN-8
產品規格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
貨號：FS-X10522
實驗報告：
一、分離與培養： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養； 5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；
5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
大腸埃希菌轉導β樣蛋白1抗體Anti-IL18 Antibody糖磺基轉移1(CHST1)
土壤德沃斯氏菌絲/蘇激TLK2抗體Anti-IL18 Antibody糖合3(CHSY3)
居真菌細菌硫氧環蛋白還原1抗體Anti-IL1B Antibody糖合1(CHSY1)
Compostimonas跨膜蛋白173抗體Anti-IL18 Antibody糖蛋白M6B(GPM6B)
大腸埃希氏桿菌跨膜蛋白147抗體Anti-IL18 Antibody(PB0057)糖蛋白M6A(GPM6A)
諾卡氏菌Ten-eleven轉運基因1蛋白抗體Anti-IL18 Antibody糖蛋白A33(GPA33)
矩圓黑盤孢四分子交聯體5抗體（四旋蛋白）Anti-IL18 Antibody糖蛋白Ⅴ(GP5)
銅綠假單胞菌四分子交聯體6抗體（四旋蛋白）Anti-IL18 Antibody羰基還原4(CBR4)
淀粉產色鏈霉菌T急性淋巴母白血病相關抗原1抗體Anti-IL1B Antibody羰基還原3(CBR3)
Bacillus aryabhattaiTM4SF3蛋白抗體Anti-IL1B Antibody羰基還原1(CBR1)
猴頭四分子交聯體10抗體（四旋蛋白）Anti-IL1B Antibody碳酐Ⅻ(CA12)
黃曲霉四分子交聯體9/四旋蛋白抗體Anti-IL1B Antibody碳酐Ⅸ(CA9)
蘇云金芽孢桿菌四分子交聯體12抗體（四旋蛋白）Anti-IL1R1 Antibody碳酐Ⅵ(CA6)
傘形卷霉四分子交聯體13抗體（四旋蛋白）Anti-IL1RN Antibody碳酐ⅤB(CA5B)
日本根霉四分子交聯體16抗體（四旋蛋白）Anti-IL1F10 Antibody碳酐Ⅳ(CA4)
多主棒孢霉四分子交聯體20抗體（四旋蛋白）Anti-IL1F10 Antibody碳酐Ⅲ(CA3)
溶質載體家族蛋白22成員5抗體化膿性鏈球菌（釀膿鏈球菌）小鼠膀胱平滑肌細胞
SNX27蛋白抗體腐皮鐮孢（斜面）小鼠腎小管上皮細胞
細胞周期G2/M期快速誘導蛋白SPDYA抗體費舍爾弧菌小鼠腎足突細胞
S100A2抗體環狀芽胞桿菌小鼠腎成纖維細胞
JNK抑制劑(JNK-IN-8)曲霉 3,3-二苯基-1-結締組織生長因子
芽孢桿 Boc-Arg(Pbf)-OH腺相關病
芽孢桿屬 二化雙(三環己基膦)鎳(II)腺相關病IgG抗體
枯草芽孢桿 N-甲基-L-脯,一水Aβ42
金色鏈霉 1,2-二(二苯基膦基)乙烷二化鈀(II)乳鐵蛋白
大腸埃希氏桿 2-(全氟辛基)乙基烯酯麻疹病抗體
釀酒酵母 2,4-二氟苯硫多巴D1受體
硬結節桿 2-氟-5-(三氟甲基)苯
固氮 3-甲氧基苯乙
黃曲霉 (S)-1-Boc-3-氨甲基吡咯烷隱孢子蟲
淺黃褐蠟傘 (S)-1-Boc-(3-Hydroxymethyl)pyrrolidine白介17
枯草芽孢桿 O-6-芐基鳥白介17A
云芝栓孔（變色栓） BOC-N-甲基-D-白介34
球孢白僵 D-阿卓糖β淀粉樣蛋白1-40
釀酒酵母 FMOC-L-4-血管性血友病因子
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