當前位置:上海撫生實業有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光探針法>> 48T 0.1PCR管土豆內源基因核酸檢測試劑盒
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
產品名稱 | 分類 | 貨號 |
土豆內源基因核酸檢測試劑盒 | 熒光探針法 | FS-P10751 |
PCR技術的定量原理:?
擴增曲線
在Real-time qPCR中,對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應的進行,監測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應過程中產生的DNA拷貝數是呈指數形式增加的,隨著反應循環數的增加,最終PCR反應不再以指數形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產物已不再呈指數級的增加,PCR的終產物量與起始模板量之間無線性關系,所以根據最終的PCR產物量不能計算出初始模板量。
服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務:DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存備用。
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
釀酒酵母培養基: 14葡萄酒用提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28℃ 真空冷凍干燥法;定期移植法
-1556℃冰箱凍結;真空冷凍干燥
紫色鏈霉菌生長條件: 28℃培養基: 0012提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
藤黃微球菌培養基: 471近海細菌水樣/表層海水提供形式: 斜面培養物模式菌株: no生長條件: 20-25℃ 液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
嗜冷假單胞菌生長條件: 16℃培養基: 7提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
芽孢桿菌對500mg/L的甲磺隆有抗性模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養物安全等級: 1培養基: 0002生長條件: 30℃
大腸埃希菌研究模式菌株: no病料提供形式: 凍干物安全等級: 2培養基: 335生長條件: 37
異常畢赤酵母培養基: 436模式菌株: no土樣提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 30℃ -80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
-1557℃冰箱凍結;真空冷凍干燥
黑木耳培養基: 14試驗栽培提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 23-25 定期移植法
匍枝根霉(黑根霉)生長條件: 25-28℃培養基: 0014提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
黃曲霉生長條件: 28℃培養基: 14提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 定期移植法
釀酒酵母培養基: CM0013利用木材水解液和亞硫廢液酒精。提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 25-28℃ 真空冷凍干燥法
蒼白桿菌在基礎鹽加農藥培養基上降解丙草胺,降解率50%模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養物安全等級: 1培養基: 0002生長條件: 30℃
AS3.2913光學儀器防霉試驗菌種。模式菌株: no種屬: Penicillium│chrysogenum提供形式: 凍干物安全等級: 1培養基: CM0015生長條件: 25-28℃
-1558℃冰箱凍結;真空冷凍干燥
高麗槐素; 馬卡因IL-12(Interleukin-12) 白介素12抗原(白介素-12)TRIM32 TRIM32抗體
秦皮苷; 白蠟樹苷IL-12(Interleukin-12)human peptide 白介素12抗原(人)TRIM31 環指蛋白HCG1抗體
奇任,奇壬IL-12R Beta2/IL12RB2 peptide 白介素-12受體β2抗原TRIM3/RNF22 環指蛋白22抗體
高良姜素IL-13(Interleukin-13) 白介素13抗原TRIM29/ATDC 共濟失調毛細血管擴張癥D相關蛋白抗體
比枯枯靈;畢靈堿;荷包牡丹堿IL-14/Taxilin alpha 白介素14抗原TRIM25 雌激素反應鋅指蛋白抗體
異槲皮苷IL-15(Interleukin-15) 白介素-15抗原TRIM17/RNF16 環指蛋白16抗體
乙酰紫堇靈; 乙酰紫堇靈堿IL-16(Interleukin-16) 白介素16抗原TRIM17/RNF16 環指蛋白16抗體
三葉豆紫檀苷IL-16/LCF(interleukin-16)(Lymphocyte Chemotactic Factor) 白介素-16抗原TRIM11/RNF92 環指蛋白92抗體
苷IL-17(Interleukin-17) 白介素-17抗原TRIM10/RNF9 環指蛋白9抗體
去氫二異丁香酚IL-17(Interleukin-17)human 白介素-17抗原(人)TRIB3/p65 interacting inhibitor of NF-kappaB 神經死亡誘導蛋白激酶抗體
土豆內源基因核酸檢測試劑盒EpsilonPolylysine ε-聚賴氨 質量規格:>98%,BC
Promestriene 普羅雌烯 質量規格:>98%,BC
Bosentanhydrate 波生坦(水合物) 質量規格:>98%,BC
Bosentanhydrate 波生坦水合(標準品) 質量規格:>98%,BC
Fosaprepitantdimeglumine 福沙吡坦二甲葡胺(MK-0517) 質量規格:>98%,BC
Prasugrel 普拉格雷 質量規格:>98%,BC
Clonidinehydrochloride 鹽可樂定 質量規格:>98%,BC
Clonidinehydrochloride 鹽可樂定(標準品) 質量規格:>98%,BC
2-Methoxyestradiol 2-甲氧基雌二醇(進分) 質量規格:>98%,BC
2-Methoxyestradiol 2-甲氧基雌二醇 質量規格:>98%,BC
2-Methoxyestradiol 2-甲氧雌二醇(標準品) 質量規格:>98%,BC
Phenforminhydrochloride 鹽乙雙胍/降糖靈/鹽乙福明 質量規格:>98%,BC
Phenforminhydrochloride 鹽乙雙胍/降糖靈/鹽乙福明(標準品) 質量規格:>98%,BC
Cefoperazonesodium 頭孢哌鈉 質量規格:>98%,BC
Cefoperazonesodium 頭孢哌鈉(標準品) 質量規格:>98%,BC
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