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貨號 | FS-X10835 |
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中文名稱:CDK抑制劑
英文名稱:AT7519 Hydrochloride
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號:FS-X10835
產品介紹:
AT7519 Hydrochloride是一種有效的CDK抑制劑,對CDK1,CDK2,CDK4-CDK6以及CDK9的IC50值分別為210,47,100,13,170和<10nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! 號:902135-91-5 純度:98.90% 分子量:418.71 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
川黃桿菌小鼠ⅩAnti-PHF1 Antibody人黏著斑激(FAK)
畢赤酵母屬人角蛋白17Anti-PHF3 Antibody人黏著斑激(FAK)
傳染性支氣管炎病大鼠糖皮質類固受體Anti-PGLS Antibody人可溶性磷脂A2(sPL-A2)
解橡膠諾卡氏菌大鼠黃體生成釋放激Anti-PHAX Antibody人可溶性磷脂A2(sPL-A2)
糙皮側耳人制瘤M受體Anti-PHF3 Antibody人脫氧核糖核Ⅰ(DNase-Ⅰ)
乳酒假絲酵母小鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉輔因子Anti-PHKB Antibody人脫氧核糖核Ⅰ(DNase-Ⅰ)
鞘脂菌小鼠前心鈉肽Anti-PHKA1 Antibody人精(Arg)
黃曲霉大鼠8異前列腺Anti-PHKG1 Antibody人精(Arg)
嗜湖短芽胞桿菌人B淋巴瘤因子3Anti-PHLDA1 Antibody人精(Arg)
香栓孔菌人癌蛋白誘導轉錄物3Anti-PHLPP1 Antibody人精(Arg)
Megamonas funiformis小鼠N端前腦鈉Anti-Phospho AATF (Ser477) Antibody堿性磷(NAP)
多粘類芽孢桿菌大鼠γ干擾誘導蛋白16/p16Anti-Phospho ABL1 (Tyr393/439) Antibody堿性磷(NAP)
中國臺灣根霉人P27蛋白Anti-Phospho ACO1 (Ser711) Antibody人間變性淋巴瘤激(ALK)
堅強芽孢桿菌小鼠纖溶抗纖溶復合物Anti-Phospho AKT1 (Thr342) Antibody人間變性淋巴瘤激(ALK)
嗜碳芽孢桿菌大鼠基質衍生因子1aAnti-Phospho ALOX5 (Ser523) Antibody人激動異構/分裂MB(CKMB)
蝙蝠蛾擬青霉大鼠血漿α顆粒膜蛋白Anti-Phospho ANAPC1 (S355) Antibody人激動異構/分裂MB(CKMB)
環指蛋白94抗體蓋囊菇小鼠樹突狀細胞肉瘤細胞
G蛋白偶聯誘導蛋白2受體抗體粘孢白僵菌大鼠回腸細胞
腺泡狀軟組織肉瘤結構域蛋白ASPC抗體黃毛黎豆根瘤菌人子宮頸內膜上皮細胞
轉錄共激活因子TAZ抗體藤黃檀根瘤菌人慢性髓樣白血病細胞
CDK抑制劑傷口諾卡氏 百清腎上腺
蘭鏈霉 百清乙型肝炎病核心抗原
粘滑菇屬 四對苯二甲肌
松口蘑 N,N-二甲基乙酰二甲基縮細小病抗體
黑曲霉 鄰氨基苯肌激同工MB
根霉 L-2,4-二氨基丁酮激M2
香港洛克氏 4-甲氧基茴香硫糖原磷化同工BB
吉氏根瘤 2,4-二甲基-6-叔丁基皮質類固11β脫氫同工1
大腸埃希氏 4-苯氧基乙空腸彎曲
伍氏束縛 3-二磷腺
根瘤屬 3-溴戊烷脂聯
烏斯懷亞海單胞 2,6-二氟苯甲酰性脂肪
雞早熟艾美爾球蟲(LZ株) (+)-2,2'-[(3aR,8aS)-3a,8a-二氫-8H-茚苯[1,2-d]并惡唑中性脂肪
絳紅鏈霉 1,2-二(二甲硅基)苯白介1β
拜耳接合酵母 N-乙酰-D-纈鈣調蛋白
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