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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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Bcl-2抑制劑(Navitoclax)

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-05-18 10:42:27瀏覽次數(shù):183次

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貨號(hào) FS-X10271
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MIP4/CCL18/FITC 熒光標(biāo)記巨噬炎癥蛋白4抗體IgGN--N-(3-磺)-3-氧苯鈉鹽 99%
Midnolin isoform Protein 1/FITC 熒光標(biāo)記中腦核仁蛋白1抗體IgG十六烷二溴化 98%
M

中文名稱:Bcl-2抑制劑(Navitoclax)

英文名稱:Navitoclax

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg

貨號(hào):FS-X10271

產(chǎn)品介紹:

英文名稱:Navitoclax

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg

Navitoclax是一種有效的Bcl-2抑制劑,對(duì)抗凋亡Bcl-2蛋白家族(包括Bcl-xL,Bcl-2和Bcl-w)具有高親和力,Ki值小于1nM。

注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

號(hào):923564-51-6

別名:ABT-263

純度:99.34%

分子量:974.61

儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);

4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

芽孢桿菌屬免疫球蛋白超家族成員10抗體Human RIMKLB Beta Agonists(β-)免疫試劑盒

芽胞桿菌大腦和特異性免疫球蛋白超家族成員11抗體Human LRP11(Low-density lipoprotein receptor-related protein 11) 19-Nortestosterone(19-去甲睪)免疫試劑盒

蘇云金芽孢桿菌鲇澤亞種干擾α受體抗體Human RIMS4 左右不對(duì)稱發(fā)育因子2(LEFTY2)

焦曲霉磷化干擾α受體抗體Human RIN3 組織因子途徑抑制物-2(TFPI-2)

玫瑰皮黃鏈霉菌磷化胰島受體β抗體Human RINT1 組織因子途徑抑制物(TFPI)

樟疫霉核因子κB抑制蛋白E抗體Human RING1 組織因子(TF)

貝萊斯芽胞桿菌磷化整合β4抗體Human ribosomal protein L4 組織型纖溶原激活劑(t-PA)

大腸埃希氏菌磷化整合β4抗體Human RIC8A 組織相容性復(fù)合體Ⅰ類相關(guān)基因A(MICA)

嗜腳動(dòng)物咸海鮮球菌IQCD蛋白抗體Human DDT(D-Dopachrome Tautomerase) 組織相容性2-K1-K區(qū)(H2-K1)

硝鹽還原嗜鹽堿桿菌IQCC蛋白抗體Human RGS5 組織多肽特異性抗原(TPS)

棲土曲霉IQCA1蛋白抗體Human RGS7(Regulator of G-protein signaling 7) 組織多肽抗原(TPA)

矩圓黑盤孢集成復(fù)雜蛋白亞單位3抗體Human RGS9 組織蛋白去乙?;?HD)

孤島海桿狀菌干擾alpha 14蛋白抗體Human RGSL1 組織蛋白抗體(Cath Ab)

嗜松籃狀菌白介6抗體Human RHBDD1 組織蛋白S(CTSS)

環(huán)狀芽胞桿菌白介-10抗體Human RHBDL2 組織蛋白L1(CTSL1/CTSL)

植物乳桿菌植物亞種白介6抗體Human RHCG 組織蛋白K(cath-K)

AS2.590資源名稱: 平滑假絲酵母 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)蘆薈

赭鮭色正青霉Eupenicillium│ochrosalmoneum 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)苦玄參IB

大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)苦玄參IA
Bcl-2抑制劑(Navitoclax)毛柄(金針菇) 2--4-氨基-6-三氟組蛋白脫乙酰基9

酒酒球 4-甲硫基苯甲p300乙酰轉(zhuǎn)移

毛霉屬 L-乳正丁酯和肽

釀酒酵母 N--2-吡咯烷酮顆粒A

中慢生華癸根瘤 2,6-二溴-4-氟苯化高鐵血紅蛋白

四脊曲霉 2-氟二二甲酯活化A受體抗體

枯草芽孢桿 5,6,7,8-四氫喹喔啉生長(zhǎng)釋放抑制

肉色栓 5--2-甲氧基促黑色釋放因子

西洼湖戈登氏 4-溴-3,5-二吡啶黑色

芽孢桿 6'-二乙氨基-2'-二芐氨基熒烷色P450

Escherichia (S)-3-羥基-2-吡咯烷酮磷肌3激

青霉屬 6-氟-4-羥基喹啉-3-羧α-淀粉

穿孔假單胞 2,6-二甲基-3-溴吡啶分泌磷蛋白1

黑曲霉 2,3,5-三溴-4-I因子補(bǔ)體片段3b

枯草芽孢桿 3-氨基-2-α-乳白蛋白;α乳清蛋白

 


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