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PFK磷酸果糖激酶檢測試劑盒微量法

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產品型號

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廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-04-11 15:10:46瀏覽次數:138次

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貨號 FS-01S63491
PFK磷酸果糖激酶檢測試劑盒微量法公司正在出售的產品:CD8抗體Phospho-Bcr(p-Tyr177)/FITC 熒光標記兔抗人、大、小鼠磷化T淋巴受體抗體IgG
CD8抗體BCRP/ABCG2/BXP-21 /FITC 熒光標記三磷腺苷結合轉運蛋白G超家族成員2抗體IgG

商品介紹:

測定意義

PFK(EC 2.7.1.11)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,負責將果糖-6-磷酸和ATP轉化為果糖-1,6二磷酸和ADP,是糖酵解過程的關鍵調節酶之一。

測定原理

PFK催化果糖-6-磷酸和ATP生成果糖-1,6-二磷酸和ADP,丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶進一步依次催化NADH氧化生成NAD+,在340nm下測定NADH下降速率,即可反映PFK活性。

需自備的儀器和用品

紫外分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;

試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;

試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;

試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;

試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。

公司產品僅用于科研提供的生化試劑盒,質量信得過產品,售后完善。服務于高校及免疫學科研單位,竭誠為您提供更周到的服務更優質的產品。

產品名稱:PFK磷酸果糖激酶檢測試劑盒微量法

規格:100管/96樣

檢測方法:微量法

貨號:FS-01S63491
QQ截圖20220307153604.png

操作步驟:

實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。

1.        加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8.       用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。

粗酶液提取:

1、細胞或組織樣品的制備:

培養細胞:先收集細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細胞數量(104個):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1ml提取液),超聲波破碎細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

2、血清(漿)樣品:直接檢測。

綿羊原纖維蛋白2(FBN2)聯免疫試劑盒長枝木霉Mouse CA15-3 (Carbohydrate Antigen 15-3) ELISA Kit

綿羊胞漿型磷脂A2(cPLA2)聯免疫試劑盒 副短短芽孢桿Mouse MMP-1 (Matrix Metalloproteinase 1) ELISA Kit

綿羊半乳糖6硫酯(Gal-6S)聯免疫試劑盒  栗色渾圓鏈霉Mouse MMP-2 (Matrix Metalloproteinase 2) ELISA Kit

綿羊血管活性腸肽(VIP)聯免疫試劑盒茶色銀耳Mouse MMP-17 (Matrix Metalloproteinase 17) ELISA Kit

綿羊磷脂A2受體1(PLA2R1)聯免疫試劑盒靈芝Mouse MMP-24 (Matrix Metalloproteinase 24) ELISA Kit

綿羊球蛋白G1(IgG1)聯免疫試劑盒產氣莢膜梭 C型Mouse MMP-7 (Matrix Metalloproteinase 7) ELISA Kit

綿羊色P450家族成員1A2(CYP1A2)聯免疫試劑盒 糞腸球Mouse MMP-8 (Matrix Metalloproteinase 8) ELISA Kit

綿羊載脂蛋白C1(ApoC1)聯免疫試劑盒 炭黑曲霉Mouse FFA (Free Fatty Acid) ELISA Kit

綿羊蛋白17(Sp17)聯免疫試劑盒釀酒酵母Mouse MT (Melatonin) ELISA Kit

綿羊γ谷酰半胱合成(γ-ECS)聯免疫試劑盒黑曲霉Mouse mIgA (membrane IgA) ELISA Kit

綿羊生存(Surv)聯免疫試劑盒三葉草根瘤Mouse MHB (Methemoglobin) ELISA Kit

綿羊NOD樣受體(NLR)聯免疫試劑盒深紅酵母Mouse Methylase ELISA Kit  

綿羊唾液(SA)聯免疫試劑盒 褐囊蜜環Mouse MAU (Microalbuminuria) ELISA Kit

綿羊蕈型乙酰膽受體亞型M2(M-AChRM2)聯免疫試劑盒秦氏蜜環Mouse MAO (Monoamine Oxidase) ELISA Kit

綿羊神經營養因子4(NT-4)聯免疫試劑盒硬水黃桿Mouse MCP-2 (Monocyte Chemotactic Protein 2) ELISA Kit
PFK磷酸果糖激酶檢測試劑盒微量法小鼠CD30分子Anti-NKx2.2 Antibody 人前膠原C端肽(PCP)elisa定量檢測試劑盒

小鼠主要組織相容性復合體Ⅱ類Anti-NKX3-1 Antibody人B-Raf原癌基因絲/蘇蛋白激(BRAF)elisa定量檢測試劑盒

人巨噬移動抑制因子Anti-NKX2-8 Antibody人N-甲基-D-天氡離子能谷受體1(GRIN1)elisa定量檢測試劑盒

大鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體Anti-NKX6-3 Antibody人趨化因子(Lptn/XCL1)elisa定量檢測試劑盒

人組織因子途徑抑制物Anti-NLRX1 Antibody人乙酰A(A-CoA)elisa定量檢測試劑盒

小鼠可溶性血管內皮蛋白C受體Anti-NKX6-3 Antibody人破骨相關受體(OSCAR)elisa定量檢測試劑盒

大鼠性磷Anti-NLE1 Antibody人葡萄糖-6-磷脫氫(G6PD)elisa定量檢測試劑盒

人干擾誘導蛋白10Anti-NMBR Antibody人白介7受體(IL7R)elisa定量檢測試劑盒

 


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