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貨號 | FS-01S63491 |
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商品介紹:
測定意義 PFK(EC 2.7.1.11)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,負責將果糖-6-磷酸和ATP轉化為果糖-1,6二磷酸和ADP,是糖酵解過程的關鍵調節酶之一。 測定原理 PFK催化果糖-6-磷酸和ATP生成果糖-1,6-二磷酸和ADP,丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶進一步依次催化NADH氧化生成NAD+,在340nm下測定NADH下降速率,即可反映PFK活性。 需自備的儀器和用品 紫外分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
公司產品僅用于科研提供的生化試劑盒,質量信得過產品,售后完善。服務于高校及免疫學科研單位,竭誠為您提供更周到的服務更優質的產品。
產品名稱:PFK磷酸果糖激酶檢測試劑盒微量法
規格:100管/96樣
檢測方法:微量法
貨號:FS-01S63491
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。 1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。 4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。 8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。 |
粗酶液提取:
1、細胞或組織樣品的制備: 培養細胞:先收集細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細胞數量(104個):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1ml提取液),超聲波破碎細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。 2、血清(漿)樣品:直接檢測。 |
綿羊原纖維蛋白2(FBN2)聯免疫試劑盒長枝木霉Mouse CA15-3 (Carbohydrate Antigen 15-3) ELISA Kit
綿羊胞漿型磷脂A2(cPLA2)聯免疫試劑盒 副短短芽孢桿Mouse MMP-1 (Matrix Metalloproteinase 1) ELISA Kit
綿羊半乳糖6硫酯(Gal-6S)聯免疫試劑盒 栗色渾圓鏈霉Mouse MMP-2 (Matrix Metalloproteinase 2) ELISA Kit
綿羊血管活性腸肽(VIP)聯免疫試劑盒茶色銀耳Mouse MMP-17 (Matrix Metalloproteinase 17) ELISA Kit
綿羊磷脂A2受體1(PLA2R1)聯免疫試劑盒靈芝Mouse MMP-24 (Matrix Metalloproteinase 24) ELISA Kit
綿羊球蛋白G1(IgG1)聯免疫試劑盒產氣莢膜梭 C型Mouse MMP-7 (Matrix Metalloproteinase 7) ELISA Kit
綿羊色P450家族成員1A2(CYP1A2)聯免疫試劑盒 糞腸球Mouse MMP-8 (Matrix Metalloproteinase 8) ELISA Kit
綿羊載脂蛋白C1(ApoC1)聯免疫試劑盒 炭黑曲霉Mouse FFA (Free Fatty Acid) ELISA Kit
綿羊蛋白17(Sp17)聯免疫試劑盒釀酒酵母Mouse MT (Melatonin) ELISA Kit
綿羊γ谷酰半胱合成(γ-ECS)聯免疫試劑盒黑曲霉Mouse mIgA (membrane IgA) ELISA Kit
綿羊生存(Surv)聯免疫試劑盒三葉草根瘤Mouse MHB (Methemoglobin) ELISA Kit
綿羊NOD樣受體(NLR)聯免疫試劑盒深紅酵母Mouse Methylase ELISA Kit
綿羊唾液(SA)聯免疫試劑盒 褐囊蜜環Mouse MAU (Microalbuminuria) ELISA Kit
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綿羊神經營養因子4(NT-4)聯免疫試劑盒硬水黃桿Mouse MCP-2 (Monocyte Chemotactic Protein 2) ELISA Kit
PFK磷酸果糖激酶檢測試劑盒微量法小鼠CD30分子Anti-NKx2.2 Antibody 人前膠原C端肽(PCP)elisa定量檢測試劑盒
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小鼠可溶性血管內皮蛋白C受體Anti-NKX6-3 Antibody人破骨相關受體(OSCAR)elisa定量檢測試劑盒
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