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貨號 | FS-X10418 |
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產品介紹:
英文名稱:PLX8394 產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg PLX8394是一種有效的,選擇性的Raf抑制劑,能夠抑制BRAFV600E的活性,IC50值約為5nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! 號:1393466-87-9 純度:98.44% 分子量:542.53 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
英文名稱:PLX8394
產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號:FS-X10418
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
金乳牛肝菌豬繁殖與呼吸綜合征/豬藍耳病病抗體Anti-BAG3 Antibodyγ肽(Pγ)
美澳型核果褐腐病菌凋亡相關蛋白10抗體Anti-BAG1 Antibodyγ谷酰轉移(GGT)
美澳型核果褐腐病菌鈣調蛋白依賴性蛋白激磷抗體Anti-BAG1 Antibodyγ-谷酰環化轉移(GGCT)
門多薩假單胞菌絲/蘇蛋白激PIM3抗體Anti-BAG5 Antibodyγ谷酰半胱合成(γ-ECS)
蠟樣芽孢桿菌組蛋白精甲基轉移5抗體Anti-BAG5 Antibodyγ谷-半胱合成(γ-GCS)
熱帶假絲酵母原鈣粘附蛋白11X抗體Anti-BAG3 Antibodyγ干擾誘導蛋白16/p16(IFI16/p16)
粉紅聚端孢霉原鈣粘附蛋白11Y抗體Anti-BAK(BAK1) Antibodyγ干擾誘導單核因子(MIGF/CXCL9)
暗褐色毛霉原鈣粘附蛋白12/血管內皮鈣粘蛋白2抗體Anti-BAG6 Antibodyγ干擾受體(IFN-γR)
枯草芽孢桿菌原鈣粘附蛋白17抗體Anti-BAP1 Antibodyγ干擾(IFN-γ)
三葉草根瘤菌原鈣粘附蛋白1抗體Anti-BAX Antibodyγ干擾(IFNγ)
杰丁畢赤酵母原鈣粘附蛋白α1抗體Anti-BAK1 Antibodyγ分泌激活蛋白(PION)
深紅原鈣粘附蛋白α3抗體Anti-BAMBI Antibodyγ基丁(GABA)
金龜子綠僵菌原鈣粘附蛋白α4抗體Anti-BAX Antibodyβ-轉導重復序列包含蛋白(BTRC)
短乳桿菌原鈣粘附蛋白α5抗體Anti-BAX Antibodyβ抑制蛋白2(ARRB2)
發酵假絲酵母原鈣粘附蛋白α9抗體Anti-BAX Antibodyβ血小板球蛋白/β血栓環蛋白(β-TG)
側毛殼原鈣粘附蛋白α7抗體Anti-BAX Antibodyβ血小板球蛋白(β-TG)
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質量規格:HPLC>98%,標準品,還原型
巴斯德畢赤酵母Pichia│pastoris 質量規格:純度大于98%,BR
干酪乳桿菌假植物亞種Lactobacillus│casei subsp .pseudoplantarum 質量規格:>99%,BR
BRAFV600E抑制劑(PLX8394)茶樹菇 3--4-(三氟甲基)苯絲織蛋白1
綠木霉 2-羥基三氟甲苯氨基己糖
托姆青霉 環己基色P4502B1
松口蘑 6-吡啶-3-有機陰離子轉運體2
蒙氏假單胞 三(4-嗎啉基)氧化膦直接高密度脂蛋白膽固
乳鏈球 2-氟-6-甲苯尿肌酐
德氏乳桿 3,4-己二酮微管相關蛋白輕鏈3
峽灣嗜冷桿 (S)-(-)-2,2′,6,6′-四甲氧基-4,4′-雙(二(3,5-二甲苯基)膦-3,3′-聯吡Adropin蛋白
茄鐮孢 (R)-(+)-2,2′,6,6′-四甲氧基-4,4′-雙(二(3,5-二甲苯基)膦-3,3′-聯吡磷化信號傳導子及轉錄激活子3
酒紅鏈霉 碳乙烯亞乙酯活性氮簇
云芝栓孔(變色栓) 二苯基酐膠原吡啶交聯
靈芝屬 胡椒脫氧膠原吡啶交聯
銅綠假單胞 環丁抗N-甲基-D-天冬受體1
泰國葡糖桿 2-苯并咪唑基乙抗N-甲基-D-天冬受體2B
中慢生華癸根瘤 2-苯二甲酰亞氨基乙烷磺酰軟骨846
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