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貨號 | FS-X10360 |
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產品介紹:
英文名稱:Volasertib 產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg Volasertib是一種高效的PLK1抑制劑,IC50值為0.87nM,同時能夠抑制Plk2和Plk3,IC50值分別為5和56nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! 號:755038-65-4 別名:BI 6727 純度:98.76% 分子量:618.81 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
中文名稱:PLK1抑制劑(Volasertib)
英文名稱:Volasertib
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號:FS-X10360
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
假單胞菌NK受體2C抗體Human LAPTM4B(Lysosomal-associated transmembrane protein 4B) 人抗卵巢抗體(AOAb)
新月彎孢霉性受體NK-p46抗體Human PTGS1(Prostaglandin G/H synthase 1) 人抗磷脂酰絲抗體(APSA)
橡膠樹假絲酵母性受體NK-p30抗體Human COL28A1(Collagen alpha-1(XXVIII) chain) 人抗磷脂抗體(Apl/APA)
水生黃桿菌磷化谷受體2A抗體Human FBLN1(Fibulin-1) 人抗磷壁抗體(TA)
日本根霉NK受體2D抗體Human FLT4(Vascular endothelial growth factor receptor 3) 人抗淋巴球蛋白(ALG)
嗜熱鏈球菌核呼吸因子-1抗體Human DICER1(Endoribonuclease Dicer) 人抗淋巴抗體(ALA/LCA)
多主葡萄殼菌神經肽Y受體2抗體Human KIF5A(Kinesin heavy chain isoform 5A) 人抗鏈球菌溶血O/抗O(ASO)
海泥黃桿菌神經絲蛋白抗體Human GAD2(Glutamate decarboxylase 2) 人抗利尿激V2受體/精加壓受體2(AVPR2)
粗皮側耳(平菇)軸索過度生長抑制因子A+B抗體 Nogo-B/AHuman FGF6(Fibroblast growth factor 6) 人抗利尿激/血管加壓/精加壓(ADH/VP/AVP)
紫芝神經元3抗體Human SERPINB4(Serpin B4) 人抗類固生成抗體(SCA)
孢小殼銀漢霉NFkB誘導激抗體Human UCN3(Urocortin-3) 人抗類風濕關節炎核抗原抗體(RANA)
Aeromicrobium marinum核因子p50/k基因結合核因子抗體Human MYH1(Myosin-1) 人抗類風濕關節炎核抗原(RANA)
硬結節桿菌神經激肽A受體/K物質受體抗體Human UBB(Polyubiquitin-B) 人抗可提取核抗原抗體(ENA-Ab)
白環柄菇神經激肽B抗體Human FGFR1(Fibroblast growth factor receptor 1) 人抗可溶性肝抗原抗體(SLA)
產黃青霉神經粘蛋白抗體Human BCAM(Basal cell adhesion molecule) 人抗菌肽(CAMP)
產氣莢膜梭菌 C型神經束蛋白抗體Human GLUL(Glutamine synthetase) 人抗菌肽(Attacin)
綠色木霉Trichoderma│viride 質量規格:>500U/MG,BR硫基葡萄糖
葡萄球菌Staphylococcus│sp. 質量規格:>98%,BR硫辛
蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質量規格:0.97硫軟骨
PLK1抑制劑(Volasertib)路德類酵母 4-芐氧基-3-氟苯前白蛋白
雞傷門氏 正丁基(含有數量不等的酐)前蛋白轉化枯草溶9
耐鹽枝孢 1,4-苯二前列環
枯草芽孢桿枯草亞種 4-聯苯前列腺D2
纖維纖維單胞 5-溴吡啶-3-前列腺E1
Auranobacter 5-溴吡啶-3-前列腺E2
喬木鏈格孢 芐基溴化鎂前列腺F
白黃鏈霉 1,2-雙(基硅氧基)乙烷前列腺F2α
Rhizobiales 雙-[γ-(三乙氧基硅)基]-四硫化物前列腺H2
枯草芽胞桿枯草亞種 1,2-雙(二甲基硅烷基)乙烷前列腺性磷
彎梗根霉 3-芐氧基-2,6-二氟苯前列腺特異性抗原
擬青霉 叔丁基二苯基硅烷前腦源性神經營養因子
短密青霉 3-(2-氨基乙基)基三乙氧基硅烷羥甲基戊二單酰
黑曲霉 9,10-蒽二二頻哪酯羥甲基戊二單酰還原
麥芽糖假絲酵母 2-氨基苯頻哪酯羥脯
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