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PEPC磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶微量法

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所  在  地上海市

更新時間:2022-04-11 15:12:51瀏覽次數:194次

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貨號 FS-01S63493
PEPC磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶微量法公司正在出售的產品:熱休克蛋白58抗體BTK/ATK /FITC 熒光標記兔抗人、大、小鼠蛋白酪激ATK抗體IgG
色C P450 17A1抗體Phospho-Btk(Tyr223) /FITC 熒光標記兔抗人、大、小鼠蛋白酪激ATK抗體IgG

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公司產品僅用于科研提供的生化試劑盒,質量信得過產品,售后完善。服務于高校及免疫學科研單位,竭誠為您提供更周到的服務更優質的產品。

產品名稱:PEPC磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶微量法
規格:100管/96樣

檢測方法:微量法

貨號:FS-01S63493
商品介紹:

測定意義

PEPC(EC 4.1.1.31)廣泛存在于動物、植物、微生物和細胞中,是催化磷酸烯醇式丙酮酸與二氧化碳反應生成草酰乙酸呈不可逆反應的酶,對三羧酸循環的運轉起重要調節作用。

測定原理:

PEPC催化磷酸烯醇式丙酮酸和CO2生成草酰乙酸和HPO42-,蘋果酸脫氫酶進一步催化草酰乙酸和NADH生成蘋果酸和NAD+,在340nm測定NADH減少速率,計算PEPC活性。

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

操作步驟:

實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。

1.        加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8.       用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。

粗酶液提取:

1、細胞或組織樣品的制備:

培養細胞:先收集細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細胞數量(104個):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1ml提取液),超聲波破碎細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

2、血清(漿)樣品:直接檢測。

試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;

試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;

試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;

試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;

試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
綿羊血小板衍生生長因子亞基A(PDGFA)聯免疫試劑盒纖細屈曲海生Mouse ICAM-1 (intercellular adhesion molecule 1) ELISA Kit

綿羊X型膠原(COL10)聯免疫試劑盒毛束霉Mouse ICAM-2 (intercellular adhesion molecule 2) ELISA Kit

綿羊α(LTA)聯免疫試劑盒 屎腸球Mouse ICAM-3 (intercellular adhesion molecule 3) ELISA Kit

綿羊線粒體肌激1B(CKMT1B)聯免疫試劑盒  金針菇Mouse IFN-α (Interferon Alpha) ELISA Kit

綿羊髓分化因子88(MYD88)聯免疫試劑盒干酪乳桿Mouse FOXO1 (Forkhead Box Protein O1) ELISA Kit

綿羊蛋白激Bγ(PKBG)聯免疫試劑盒枯斑擬盤多毛孢Mouse IFI16/p16 (Interferon-inducible Protein 16) ELISA Kit

綿羊凋亡誘導因子(AIF)聯免疫試劑盒 Lactococcus sp.Mouse IFN-α-Ab (Interferon-α Antibody) ELISA Kit

綿羊粘附蛋白1(CYTH1)聯免疫試劑盒  匍匐曲霉Mouse UCP-1 (Uncoupling Protein 1, Mitochondrial) ELISA Kit

綿羊膀胱腫瘤抗原(BTA)聯免疫試劑盒 草青霉Mouse FIL1d (Interleukin 1 Delta) ELISA Kit

綿羊補體成分3a(C3a)聯免疫試劑盒 PseudarthrobacterMouse FIL1h (Interleukin 1 Eta) ELISA Kit  

綿羊水通道蛋白3(AQP-3)聯免疫試劑盒 糞纖維單胞Mouse IL-34 (Interleukin 34) ELISA Kit

綿羊破骨相關受體(OSCAR)聯免疫試劑盒腐皮殼Mouse IL-3 (Interleukin 3) ELISA Kit

綿羊IV型膠原(COL4)聯免疫試劑盒平菇新宇711Mouse IL-5 (Interleukin 5) ELISA Kit

綿羊組織型纖溶原激活因子(tPA)聯免疫試劑盒少根根霉Mouse IL-7 (Interleukin 7) ELISA Kit

綿羊蛋白二硫化物異構A6(PDIA6)聯免疫試劑盒米曲霉Mouse IL-9 (Interleukin 9) ELISA Kit
PEPC磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶微量法溴代十四烷 98%聚氯乙烯 K-value 62-60 ED-1 (Ectodermal Dysplasia 1)  外胚層發育不良抗原

1-溴代正己烷 99%聚氯乙烯 K-value 59-55rhEGF(rh-Epidermal growth factor)  重組長因子

溴代正丁烷 CP,98% AR,99.5%(劇品)EGF(Epidermal growth factor)rat  重組表皮生長因子抗原(大鼠)

1-溴代正辛烷 98%三乙 CP,98.0%EGFL7(EGF-like domain containing protein 7)  類表皮生長因子域7抗原

1-溴-3-氯烷 99%四氯乙烯 AR,98%Egr-1(Early growth response 1)  早期反應基因-1/應急反應生長基因1抗原

溴代異丁烷 98%間甲 GR,99%phospho-eIF4E(pSer209)(phospho-Eukaryotic translation initiation factor 4E)  磷化eIF-4E(Ser209)抗原

溴代叔丁烷, 包含0.5%碳穩定劑, CP乙乙烯酯  99.0%ELK1  轉錄因子ELK1抗原

溴代叔丁烷  >98.0%(GC)乙 98%Elastin  彈性蛋白抗原

 


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