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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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FDP果糖1,6二磷酸檢測(cè)試劑盒微量法

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更新時(shí)間:2022-04-11 15:17:05瀏覽次數(shù):203次

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貨號(hào) FS-01S63497
FDP果糖1,6二磷酸檢測(cè)試劑盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:核基質(zhì)蛋白3抗體脈沖凝膠電泳DNA產(chǎn)物切試劑盒
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磷二羥丙酮酰基轉(zhuǎn)移抗體非同位AP化學(xué)發(fā)光法DNA南方雜交試劑盒

商品介紹:

測(cè)定意義

果糖1,6-二磷酸是機(jī)體內(nèi)的高能代謝物和代謝調(diào)控劑,是糖酵解途徑的重要中間體,廣泛存在于動(dòng)植物和微生物體內(nèi),能影響細(xì)胞內(nèi)鉀離子的濃度,改善葡萄糖和其他能量底物的代謝,促進(jìn)組織氧的釋放,廣泛應(yīng)用于臨床醫(yī)藥制劑。

測(cè)定原理

醛縮酶催化果糖1,6-二磷酸降解,產(chǎn)物與DNPH縮合成紫紅色物質(zhì),在540nm有特征吸收峰。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、低溫離心機(jī)、研缽、恒溫水浴鍋、可見(jiàn)分光光度計(jì)、微量石英比色皿。

試劑的組成和配制:

提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;

試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;

試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;

試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;

試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。

公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒,質(zhì)量信得過(guò)產(chǎn)品,售后完善。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位,竭誠(chéng)為您提供更周到的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。

產(chǎn)品名稱:FDP果糖1,6二磷酸檢測(cè)試劑盒微量法

規(guī)格:100管/96樣

檢測(cè)方法:微量法

貨號(hào):FS-01S63497
QQ截圖20220307153604.png

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。

粗酶液提?。?/span>

1、細(xì)胞或組織樣品的制備:

培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1ml提取液),超聲波破碎細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

2、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。

綿羊脫氫表雄酮硫酯(DHEA-S)聯(lián)免疫試劑盒 孢小克銀漢霉輪生變種Mouse PI3K2a (Phosphoinositide 3 Kinase 2a) ELISA Kit  

綿羊粘蛋白4(MUC4)聯(lián)免疫試劑盒大豆慢生根瘤Mouse PLA1 (Phospholipase A1) ELISA Kit  

綿羊樁蛋白(Pax)聯(lián)免疫試劑盒類干酪乳桿Mouse PLAA (Phospholipase A1 Activating Protein) ELISA Kit  

綿羊甲狀腺激球蛋白(TSI)聯(lián)免疫試劑盒假單胞Mouse LDLR (Low Density Lipoprotein Receptor) ELISA Kit

綿羊球蛋白G Fc段結(jié)合蛋白(FcγBP)聯(lián)免疫試劑盒 氧化葡糖桿Mouse PLCg1 (Phospholipase C Gamma 1) ELISA Kit  

綿羊磷脂酰肌蛋白聚糖4(GPC4)聯(lián)免疫試劑盒 酮丁梭Mouse PI3K (Phosphotylinosital 3 kinase) ELISA Kit

綿羊胰島樣生長(zhǎng)因子2受體(IGF2R)聯(lián)免疫試劑盒無(wú)花果曲霉Mouse PEDF (Pigment Epithelium Derived Factor) ELISA Kit

綿羊葡萄糖激調(diào)節(jié)蛋白(GKRP)聯(lián)免疫試劑盒 藍(lán)灰色異壁放線Mouse PIR (Pirin) ELISA Kit

綿羊神經(jīng)降壓(NT)聯(lián)免疫試劑盒 Leucostoma niveumMouse PACAPR1 (Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide Receptor 1) ELISA Kit  

綿羊蛋白激C-γ(PKCγ)聯(lián)免疫試劑盒異常漢遜酵母異常變種Mouse PACAP (Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide) ELISA Kit

綿羊β肌動(dòng)蛋白(β-actin)聯(lián)免疫試劑盒 蠟樣芽胞桿Mouse PGF (Placental Growth Factor) ELISA Kit

綿羊小表皮粘蛋白(SBEM)聯(lián)免疫試劑盒葡萄狀穗霉屬M(fèi)ouse PKP2 (Plakophilin 2) ELISA Kit  

綿羊血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)聯(lián)免疫試劑盒炭黑曲霉Mouse PAP (Plasmin-Antiplasmin Complex) ELISA Kit

綿羊硫軟骨(CS)聯(lián)免疫試劑盒  腸桿屬M(fèi)ouse PAI-1 (Plasminogen Activator Inhibitor 1) ELISA Kit

綿羊FMS樣酪激3(Flt3)聯(lián)免疫試劑盒 侵染鏈格孢M(jìn)ouse PAI-2 (Plasminogen Activator Inhibitor 2) ELISA Kit  
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