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產地 | 國產 | 加工定制 | 是 |
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適用領域 | 科研 | 貨號 | FS-01X9702 |
產品屬于:
產品名稱:大鼠胸大動脈平滑肌細胞
產品英文:A7r5
貨號:FS-01X9702
細胞培養條件:DMEM(含NaHCO3 1.5g/L)+10%FBS+1%L-氨酰胺+1%P/S
生長狀態:貼壁生長
產品規格:1×106
單位:T25/瓶
是否提供細胞STR鑒定:不提供STR鑒定報告
保存培養溫度(℃)37
運輸溫度(℃):常溫
細胞培養的優點:
1.研究的對象是活細胞 在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。 2.研究條件可以人為控制 pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。 3.研究的樣本可以達到比較均一性 通過細胞培養一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。 4.研究內容便于觀察、檢測和記錄 采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。 |
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
注意事項:
1. 接收到細胞,肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。 2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。 3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。 4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。 5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。 6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。 7.換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2培養。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
人假定蛋白LOC677340 ELISA試劑盒human hypothetical protein LOC677340 ELISA Kit
人假定蛋白LOC433328 ELISA試劑盒human hypothetical protein LOC433328 ELISA Kit
人髓樣分化因子初次應答基因88(MYD88)ELISA試劑盒human myeloid differentiation primary response gene 88,MYD88 ELISA Kit
人干擾活化基因205(Ifi205)ELISA試劑盒human interferon activated gene 205,Ifi205 ELISA Kit
人白細胞免疫球蛋白樣受體亞家族B成員4(LILRB4)ELISA試劑盒human leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 4,LILRB4 ELISA Kit
人C型凝集結構域家族4成員E(CLEC4E)ELISA試劑盒human C-type lectin domain family 4 member e,CLEC4E ELISA Kit
人假定蛋白LOC677168 ELISA試劑盒human Hypothetical protein LOC677168 ELISA Kit
人淋巴細胞抗原6復合物基因座A(Ly6a)ELISA試劑盒human lymphocyte antigen 6 complex locus A,Ly6a ELISA Kit
人嗜性白血球相關之RNA水解酵家族成員1(EAR1)ELISA試劑盒human eosinophil-associated ribonuclease A family member 1,EAR1 ELISA Kit
人混合系列蛋白激樣結構域(MLKL)ELISA試劑盒human mixed lineage kinase domain-like,MLKL ELISA Kit
人過氧化物體增殖激活物受體γ輔激活因子1α(PPARGC1)ELISA試劑盒human peroxisome proliferative activated receptor gama coactivator 1 alpha,PPARGC1 ELISA Kit
人類似cDNA順序BC027382 ELISA試劑盒human similar to cDNA sequence BC027382 ELISA Kit
人類似RIKEN cDNA 4931408D14 基因 ELISA試劑盒human similar to RIKEN cDNA 4931408D14 gene ELISA Kit
人REST協阻抑因子3(RCOR3)ELISA試劑盒human REST corepressor 3,RCOR3 ELISA Kit
人集蛋白亞家族成員11(COLEC11)ELISA試劑盒Human collectin sub-family member 11,COLEC11 ELISA Kit
人α1β糖蛋白(α1β-GP)ELISA試劑盒Human α1β glycoprotein,α1β-GP ELISA Kit
人可溶性髓系細胞觸發受體-1(sTREM-1)ELISA試劑盒Human soluble Triggering Receptor Expresses on Myeloid Cells-1,sTREM-1 ELISA Kit
人肌抑(MSTN)ELISA試劑盒Human Myostatin,MSTN ELISA Kit
人黑瘤衍生亮拉鏈額外核因子(MLZE)ELISA試劑盒Human melanomaderived leucine zipper extra-nuclear factor,MLZE ELISA Kit
大鼠胸大動脈平滑肌細胞p95 NBS1/Cell cycle regulatory protein p95 細胞周期調節蛋白P95抗體規格: 0.2ml
phospho-p95 NBS1(Ser343) 磷化滑膜細胞凋亡抑制物1抗體規格: 0.1ml
FAM123B/AMER1 腎母細胞瘤X蛋白抗體規格: 0.2ml
KARS2/Lysyl tRNA synthetase 賴tRNA的連接抗體規格: 0.2ml
WSTF 轉錄因子WSTF抗體規格: 0.2ml
Wnt8A 信號通路WNT8A抗體規格: 0.2ml
WNT2 信號通路Wnt2抗體規格: 0.2ml
CtIP/RBBP8 視網膜母細胞瘤結合蛋白8抗體規格: 0.2ml
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