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貨號	FS-01S63719

公司產品僅用于科研提供的生化試劑盒，質量信得過產品，售后完善。服務于高校及免疫學科研單位，竭誠為您提供更周到的服務更優質的產品。

規格：100管/96樣

檢測方法：微量法

貨號：FS-01S63719
商品介紹：

測定意義

土壤磷酸酶是催化土壤有機磷礦化的酶，其活性的高低直接影響著土壤中有機磷的分解轉化及其生物有效性，是評價土壤磷素生物轉化方向與強度的指標。磷酸酶活性受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH的顯著影響，根據最適PH范圍，一般把土壤磷酸酶分為中性、酸性和堿性三種類型。

測定原理：

中性環境中，S-NP催化磷酸苯二鈉水解生成苯和磷酸氫鈉，通過測定酚的生成量即可計算出NP活性。

自備儀器和用品：

紫外分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、臺式離心機、37℃恒溫培養箱、分析天平、可調式移液器、冰、蒸餾水、乙醇和甲苯。

試劑的組成和配制：

提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；

試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。
QQ截圖20220307153604.png

粗酶液提取：

1、細胞或組織樣品的制備：

培養細胞：先收集細胞到離心管內，離心后棄上清；按照細胞數量（104個）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1ml提取液），超聲波破碎細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。組織：按照組織質量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

2、血清（漿）樣品：直接檢測。

操作步驟:

實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數。

1. 加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3. 溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。

4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5. 溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。

6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進行檢測。

大鼠白介20(IL-20)試劑盒Human CHPT1 (Cholinephosphotransferase 1) ELISA KIT磷化粘著斑激抗體

大鼠白活化黏附因子(ALCAM)試劑盒 Human CHKB (Choline/ethanolamine kinase) ELISA KIT磷化粘著斑激抗體

大鼠胰淀(IAPP)試劑盒 Human DAB1(Disabled homolog 1) ELISA Kit下頜發育不良綜合征相關蛋白FAKD3抗體

大鼠血管生成樣蛋白3(ANGPTL3)試劑盒 Human CENPT (Centromere protein T) ELISA KITFAM134B蛋白抗體

大鼠髓鞘相關糖蛋白(MAG)試劑盒 Human CDCA7L (Cell division cycle-associated 7-like protein) ELISA KIT磷化范可尼貧血組蛋白A抗體

大鼠胎球蛋白A(FETUA)試劑盒 Human CGREF1 (Cell growth regulator with EF hand domain protein 1) ELISA KIT范可尼綜合征相關蛋白FANCC抗體

大鼠Dickkopf相關蛋白3(DKK3)試劑盒Human CHKA (Choline kinase alpha) ELISA KITFXYD離子轉運調節因子6抗體

大鼠血管緊張轉化2(ACE2)試劑盒 Human CHKB (Choline/ethanolamine kinase) ELISA KITFyn結合蛋白抗體

大鼠晚期糖基化終末產物(AGE)試劑盒 Human CHPT1 (Cholinephosphotransferase 1) ELISA KIT鋅指蛋白FYCO1抗體

大鼠胰島降解(IDE)試劑盒Human CNTLN (Centlein) ELISA KITFYTTD1蛋白抗體

大鼠過氧化氫(CAT)ELISA kitHuman CHRM1 (Muscarinic acetylcholine receptor M1) ELISA KITRNA結合蛋白9抗體

大鼠總膽汁(TBA)試劑盒 Human CENPT (Centromere protein T) ELISA KIT巖藻糖轉移11抗體

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大鼠晚期糖基化終末產物(AGEs)試劑盒 Human CHEK1 (Serine/threonine-protein kinase Chk1) ELISA KIT鈣粘樣蛋白28抗體
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