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貨號 | FS-01S63717 |
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產品名稱:SACP土壤酸性磷酸酶可見分光光度法
規格:50管/48樣
檢測方法:可見分光光度法
貨號:FS-01S63717
商品介紹:
測定意義 土壤磷酸酶是一類催化土壤有機磷化合物礦化的酶,其活性的高低直接影響著土壤中有機磷的分解轉化及其生物有效性,是評價土壤磷素生物轉化方向與強度的指標。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH顯著影響。通常按照其最適pH范圍,分為堿性、中性和酸性三種類型磷酸酶。 測定原理: 堿性環境中,S-AKP/ALP催化磷酸苯二鈉水解生成苯和磷酸氫二,通過測定酚的生成量即可計算出S-AKP/ALP活性。 自備儀器和用品: 紫外分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、臺式離心機、37℃恒溫培養箱、分析天平、可調式移液器、冰、蒸餾水、無水乙醇和甲苯。 |
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。 1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。 4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。 8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。 |
粗酶液提取:
1、細胞或組織樣品的制備: 培養細胞:先收集細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細胞數量(104個):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1ml提取液),超聲波破碎細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。 2、血清(漿)樣品:直接檢測。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
大鼠促胰液(SCT)聯免疫試劑盒巴貝斯蟲未定種(伊寧株)Snail (C15D3) Rabbit mAb
大鼠分泌型球蛋白A(sIgA)聯免疫試劑盒天麻蜜環A9*Phospho-FRA1 (Ser265) Antibody
大鼠分泌性白肽抑制劑(SLPI)聯免疫試劑盒棒彎孢Phospho-Gab2 (Tyr452) Antibody
大鼠內皮選擇(SELE)聯免疫試劑盒蠟狀芽孢桿Phospho-Gab2 (Tyr452) (C33G1) Rabbit mAb
大鼠硒蛋白P(SEPP1)聯免疫試劑盒須芒草伯克霍爾德氏Phospho-Gab2 (Tyr452) (C33G1) Rabbit mAb
大鼠臂板蛋白7A(SEMA7A)聯免疫試劑盒綠針假單胞Phospho-Gab2 (Ser159) Antibody
大鼠絲/蘇蛋白磷(STK)聯免疫試劑盒雞葡萄球ERCC1 Antibody
大鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)聯免疫試劑盒擬枝孢鐮孢Glycogen Synthase (15B1) Rabbit mAb
大鼠性別決定區Y框蛋白2(SOX2)聯免疫試劑盒平菇—紫孢側耳NuMA Antibody
大鼠性結合球蛋白(SHBG)聯免疫試劑盒假單胞MAGE-A3 (E9S4X) Rabbit mAb
大鼠信號轉導和轉錄激活5 b(STAT5B)聯免疫試劑盒雅致小克銀漢霉HS1 (D83A8) XP® Rabbit mAb (Human Specific)
大鼠輔肌動蛋白α2 (ACTN2)聯免疫試劑盒假單胞屬ARC (D7Q3G) Rabbit mAb
大鼠Slit同源物2(SLIT2) 聯免疫試劑盒殼二胞屬Phospho-Glycogen Synthase (Ser641) Antibody
大鼠小核核糖核蛋白D 1(SNRPD1)聯免疫試劑盒球孢白僵HS1 (D5A9) XP® Rabbit mAb (Rodent Specific)
大鼠可溶性CD14(sCD14)聯免疫試劑盒蒼白桿Phospho-PKC (pan) (gamma Thr514) (D6Y3D) Rabbit mAb
SACP土壤酸性磷酸酶可見分光光度法銜接蛋白γ/γ1-Adaptin抗體Human WDR92 ELISA Kit氟尼考
半乳糖瓦爾登轉化抗體Human WIT1 ELISA Kit正磷鐵二水物
半乳糖凝集10抗體Human WNK4 ELISA KitDL-蘋果鈣
半乳糖激2抗體Human WNT3(Proto-oncogene Wnt-3) ELISA Kit3-氯甲
半乳糖脫氫抗體Human WRAP53 ELISA Kit四氧嘧
硫軟骨裂解抗體Human WRN ELISA Kit補骨脂
多肽N-乙酰基半乳糖轉移10抗體Human WDR81 ELISA Kitα-香附酮
多肽N-乙酰基半乳糖轉移11抗體Human WSB1 ELISA Kit五味子酯甲
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