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貨號(hào)	FS-01S63289

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱	規(guī)格	檢測(cè)方法	貨號(hào)
SOD超氧化物歧化酶檢測(cè)試劑盒可見分光光度法	50管/48樣	可見分光光度法	FS-01S63289

商品介紹：

測(cè)定意義

SOD（EC 1.15.1.1）廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，催化超氧化物陰離子發(fā)生岐化作用，生成H2O2和O2。SOD不僅是超氧化物陰離子清除酶，也是H2O2主要生成酶，在生物抗氧化系統(tǒng)中具有重要作用。

測(cè)定原理：

通過氧化酶反應(yīng)系統(tǒng)產(chǎn)生超氧陰離子(O2-.)，O2-.可還原氮藍(lán)四唑生成藍(lán)色甲臜，后者在560nm處有吸收；SOD可清除O2-.，從而抑制了甲臜的形成；反應(yīng)液藍(lán)色越深，說明SOD活性愈低，反之活性越高。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

樣本前處理步驟：
樣本處理前須知

處理任何樣本時(shí),都必須注意:

(1) 實(shí)驗(yàn)中必須使用一次性吸頭,在吸取不同的試劑時(shí)要更換吸頭(2)實(shí)驗(yàn)前須檢查各種實(shí)驗(yàn)器具是否干凈,必要時(shí)對(duì)實(shí)驗(yàn)器具進(jìn) 行清潔,避免污染干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

(a)組織樣品處理方法:

1、稱取5±0.05g組織樣品于50ml離心管中,先加入3ml已稀釋好的樣品提取液震蕩2min;再加入10ml乙腈,充分震蕩5min,

2、加入2g中性氧化鋁;震蕩2min ,室溫4000r/min以上,離心10min;;

3、取6ml上清液于干凈離心管中,加入5ml二氯甲烷震蕩3min ,室溫4000r/min以上,離心10min;;

4、取下層清澈液體于玻璃管中,加入20ul氧化劑混勻,在56℃條件下氮?dú)饣蚩諝饬鞔抵?干燥;

5、加入1ml復(fù)溶液,充分溶解干燥殘留物。

6、取100ul 上清液與100ul 已稀釋好的復(fù)溶液充分混合30s,

7、取50ul進(jìn)行分析。

樣本稀釋倍數(shù): 1倍

(b)水樣品處理方法:

1、取50ul 上清液與450ul 已稀釋好的復(fù)溶液充分混合30s,

2、取50ul進(jìn)行分析。

樣本稀釋倍數(shù):10倍

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實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí)，避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會(huì)自然流下去。

2、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快，以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。

3、溫浴時(shí)，要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板，防止水分的蒸發(fā)。

4、洗液不夠時(shí)，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。

5、實(shí)驗(yàn)時(shí)，要使底物避光保存。

6、洗板時(shí)，每次洗液加入后，應(yīng)靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機(jī)時(shí)，倒去液體后，要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。

7、要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出，使各種試劑都恢復(fù)到室溫，以使結(jié)果更穩(wěn)定。

8、吸取液體時(shí)，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。

9、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后，要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)。

10、液體全部加完后，可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒，混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。