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TRPV1激動劑(Capsaicin)

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-05-18 11:53:35瀏覽次數(shù):200次

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貨號 FS-X10361
TRPV1激動劑(Capsaicin)正在熱銷的產(chǎn)品:Phospho-Smad3 (Ser423/425) /FITC 熒光標(biāo)記化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3抗體IgGN-叔丁氧羰-N'-(酰)-L-賴氨 BR
Smad4/FITC 熒光標(biāo)記Smad4抗體IgGN-叔丁氧羰-N'-(2-芐氧羰)-L-賴氨 98%
Smad7/FITC 熒光標(biāo)記Smad 7抗體IgGNα-BOC-Nε-FMO

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);

4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

中文名稱:TRPV1激動劑(Capsaicin)

英文名稱:Capsaicin

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|50mg|100mg

貨號:FS-X10361

產(chǎn)品介紹:

英文名稱:Capsaicin

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|50mg|100mg

Capsaicin是一種TRPV1激動劑,作用HEK293細(xì)胞,EC50為0.29±0.05μM。

注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

號:404-86-4

別名:(E)-Capsaicin;8-Methyl-N-vanillyl-trans-6-nonenamide

純度:98.39%

分子量:305.41

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

豇豆慢生根瘤菌高分子量神經(jīng)絲蛋白抗體Human FBLN2(Fibulin-2) 人抗菌肽(Att)

檸條根瘤菌核因子/k基因結(jié)合核因子抗體Human FGG(Fibrinogen gamma chain) 人抗性磷5b(TRACP-5b)

枯草芽孢桿菌低分子量神經(jīng)絲蛋白抗體Human VIP(VIP peptides) 人抗性磷(TRACP)

 (蠟狀芽胞桿菌)中分子量神經(jīng)絲蛋白抗體Human TNFRSF10A(Tumor necrosis factor receptor superfamily member 10A) 人抗抗體(AsAb)

芽孢桿菌生長抑制蛋白NDN抗體Human FGG(Fibrinogen gamma chain) 人抗角蛋白絲聚集/絲集蛋白抗體(AFA)

鏈霉菌神經(jīng)生長因子β抗體Human BCAM(Basal cell adhesion molecule) 人抗角蛋白抗體(AKA)

廣食黃桿菌鼻咽癌相關(guān)基因6抗體Human VIP(VIP peptides) 人抗膠原蛋白抗體(CLA)

糖化酵母鈉氫通道蛋白抗體Human CTGF(Connective tissue growth factor) 人抗甲狀腺微粒體抗體(ATMA/TMAB)

青貯窖芽孢桿菌鈉離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體Human βEP(Beta-endorphin) 人抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)

枯草芽孢桿菌神經(jīng)元特異性烯化/γ 烯化抗體Human LRP2(Low-density lipoprotein receptor-related protein 2) 人抗甲狀腺過氧化物抗體(TPO-Ab)

釀酒酵母神經(jīng)營養(yǎng)因子-3前蛋白抗體Human BMPR1A(Bone morphogenetic protein receptor type-1A) 人抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)

枯草芽孢桿菌核受體相關(guān)因子-1抗體Human CD86(T-lymphocyte activation antigen CD86) 人抗肌聯(lián)蛋白抗體(TTN)

釀酒酵母核因子2相關(guān)因子2抗體Human CXCR1(C-X-C chemokine receptor type 1) 人抗肌動蛋白抗體(AAA)

頂青霉神經(jīng)纖毛蛋白1抗體Human C3(Complement C3) 人抗黃體生成抗體(Anti LH Ab)

扣囊復(fù)膜孢酵母神經(jīng)生長因子4/5抗體Human LPA(Lipoprotein a) 人抗環(huán)胍肽抗體(CCP)

黑紫紅菇巢蛋白NID2抗體Human CP(Ceruloplasmin) 人抗環(huán)瓜肽抗體(CCP)

桔綠木霉Trichoderma citrinoviride Bissett 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR咖啡

平田頭菇Agrocybe│pediades (Fr.) Fayod 質(zhì)量規(guī)格:BR,>7U/MG, powder氧化

白馬勃Calvatia│candida (Rostk.) Hollós 質(zhì)量規(guī)格:活力≥30000u/g
TRPV1激動劑(Capsaicin)皺孢鏈霉 4-氨基苯頻哪酯

普通變形桿 鄰氨基苯鹽鹽清道夫受體B類I型

哈茨木霉 2-基嘧啶-5-頻哪酯球蛋白

紫紅曲霉 9-蒽趨化因子配體5

環(huán)帶擬盤多毛孢 2-蒽去甲腎上腺

桔青霉 3-氨基-4-固酮

嗜松青霉 4-氨苯基鹽鹽糖還原

薄花邊傘2-1 4-乙酰氧基苯基頻吶酯缺血修飾白蛋白

擴(kuò)展青霉 3-氨基苯頻吶酯熱休克蛋白-70

鐮刀 仲丁基化鎂絨毛膜促性腺β

串珠鐮刀* 3-溴化鎂溶

煙芽孢桿 仲丁基鋰溶血磷脂

釀酒酵母 叔丁基鋰肉堿

淡黃濕傘 對甲肉堿脂酰轉(zhuǎn)移

球孢枝孢 對肉堿脂酰轉(zhuǎn)移I
操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

 


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