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VEGFR多靶點抑制劑(Pazopanib)

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-18 15:13:59瀏覽次數:182次

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貨號 FS-X10504
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中文名稱:VEGFR多靶點抑制劑(Pazopanib)

英文名稱:Pazopanib

產品規格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg

貨號:FS-X10504

產品介紹:

英文名稱:Pazopanib

產品規格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg

Pazopanib是一種有效的多靶點抑制劑,作用于VEGFR1,VEGFR2,VEGFR3,PDGFRβ,c-Kit,FGFR1和c-Fms,IC50分別為10,30,47,84,74,140和146nM。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途!

號:444731-52-6

別名:GW786034

純度:99.44%

分子式:C??H??N?O?S

分子量:437.52

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

枯草芽孢桿菌絲/蘇蛋白激TNN13K抗體Anti-HAVCR1 Antibody無脈絡膜蛋白(CHM)

根瘤菌環指蛋白16抗體Anti-HAVCR1 Antibody無翅型MMTV整合位點家族成員9B(WNT9B)

游動球菌抗體Anti-HAVCR1 Antibody無翅型MMTV整合位點家族成員7B(WNT7B)

大腸埃希菌白介1受體銜接蛋白抗體Anti-HBA1; Antibody無翅型MMTV整合位點家族成員7A(WNT7A)

芽孢桿菌屬磷化白介1受體銜接蛋白抗體Anti-HAVCR2 Antibody無翅型MMTV整合位點家族成員5B(WNT5B)

平田頭菇腫瘤壞死因子α誘導蛋白3相互作用蛋白2抗體Anti-HCN1 Antibody無翅型MMTV整合位點家族成員5A(WNT5A)

微綠蠟質菌癌抗雌激抵抗蛋白2抗體Anti-HBD Antibody無翅型MMTV整合位點家族成員4(WNT4)

枯草芽孢桿菌枯草亞種凝血調節蛋白/血栓調節抗體Anti-HCN2 Antibody無翅型MMTV整合位點家族成員3A(WNT3A)

釀酒酵母腫瘤壞死因子受體相關蛋白3抗體Anti-HCVAg Antibody無翅型MMTV整合位點家族成員3(WNT3)

PL12(平菇)腫瘤壞死因子受體相關因子6抗體Anti-HDAC10 Antibody無翅型MMTV整合位點家族成員2(WNT2)

水生黃桿菌神經干抑制相關蛋白TRIM32抗體Anti-HDAC11 Antibody(PB0674)無翅型MMTV整合位點家族成員11(WNT11)

運動節桿菌抗體Anti-HDAC3 Antibody無翅型MMTV整合位點家族成員10B(WNT10B)

抗生鏈霉菌速激肽受體3抗體Anti-HDAC2 Antibody無翅型MMTV整合位點家族成員10A(WNT10A)

紅細菌屬凋亡相關蛋白5抗體Anti-HDAC3 Antibody無翅型MMTV整合位點家族成員1(WNT1)

腐皮鐮刀菌微管蛋白γ/Tubulin γ抗體Anti-HDAC4 Antibody無孢蛋白(ASPN)

嗜乳桿菌血管生成受體1抗體Anti-HDAC5 Antibody蝸管蛋白(COIL)

肌漿網鈣ATP1/內質網鈣ATP1抗體解脂亞羅酵母人輸尿管上皮細胞

SPNS1抗體溜曲霉人腎管狀上皮細胞

電壓門控鈉通道SCN3B蛋白抗體分枝犁頭霉人胎盤羊膜細胞

結合珠蛋白家族3A1抗體紅曲霉屬人胚胎滋養層細胞
VEGFR多靶點抑制劑(Pazopanib)中度嗜熱雙突柄 (R)-(+)-α,α-二苯基脯氨腎上腺

葡萄孢霉屬 基化鎂纖維

管毛殼 5-溴-2-吡啶白介8

非洲黑蛋巢 1-正丁基-1-甲基吡咯烷二(三氟甲基磺酰)酰亞轉鐵蛋白

紫荊生葉點霉 1-甲基-1-基吡咯烷雙(三氟甲磺酰)亞鹽

香菇 1-對磺酰咪唑瘟病抗體

子午線假單胞 Methyl 6-hydroxy-5-nitropyridine-3-carboxylate腫瘤壞死因子α

 口腔支原體 4-溴-2-瘟病

長野解支鏈淀粉芽孢桿 6-溴-2-甲基-3-硝基吡啶細小病

扶桑本森頓酵母 2-氨基-5-硝基-6-

釀酒酵母 6--2-甲基-3-硝基吡啶生長

鏈霉 2--3-甲基-5-硝基吡啶胰島生長因子1

溫特曲霉原變種 4-羥基-3-球蛋白

鍺栓孔 氮氧自由基β2微球蛋白

香菇 1-氨基環丁烷羧低密度脂蛋白

 


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