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貨號 | FS-X10363 |
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產品介紹:
英文名稱:AZD3965 產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg AZD3965是一種選擇性的MCT1抑制劑,抑制MCT1,Ki為1.6nM。比作用于MCT2選擇性高6倍,濃度高達10μM,也不抑制MCT3和4。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! 號:1448671-31-5 純度:99.67% 分子量:515.51 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
中文名稱:MCT1抑制劑(AZD3965)
英文名稱:AZD3965
產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號:FS-X10363
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
紅色雷夫松氏菌EGR1結合蛋白2抗體Human TNFRSF8(Tumor necrosis factor receptor superfamily member 8) 人抗肝PF4復合物抗體/HIT抗體(HIT)
水生拉恩氏菌硝基化α-突觸核蛋白Human CD28(T-cell-specific surface glycoprotein CD28) 人抗肝腎微粒體抗體(LKM)
博韋環紋炭團菌NK2轉錄樣蛋白B抗體Human CTSL2(Cathepsin L2) 人抗肝可溶性抗原抗體(SLA)
釀酒酵母神經正五聚體1抗體Human APOA2(Apolipoprotein A-II) 人抗鈣調特異抗體(CAM-ab)
大腸埃希氏桿菌核孔蛋白NUP160抗體Human NPS(Neuropeptide S) 人抗鈣蛋白抑抗體(AT-DⅣ)
中國木霉核分離基因C蛋白抗體Human CD276(CD276 antigen) 人抗肺泡基底膜抗體(ABM-Ab)
黑曲霉磷化核分離基因C蛋白抗體Human TNFRSF8(Tumor necrosis factor receptor superfamily member 8) 人抗紡錘體抗體(MSA)
熱帶假絲酵母神經特異性轉錄因子DPF1抗體Human COR(Cortisol) 人抗多發性肌炎硬皮病抗體(PM-Scl/PM-1)
球孢白僵菌N-乙酰轉移8抗體Human APOC2(Apolipoprotein C-II) 人抗蛋白3抗體IgG(PR3 Ab-IgG)
漆柄小孔菌N-乙酰轉移8B抗體Human CAT(Catalase) 人抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)
血痕韌革菌NOMO蛋白抗體Human APOB(Apolipoprotein B-100) 人抗單核抗體(AMA)
梅林青霉鈉離子轉運蛋白1抗體Human AGE(Advanced glycation end-product) 人抗存活抗體/生存蛋白(Surv)
鏈霉菌鈉離子/氫離子交換蛋白3抗體Human TNNI1(Troponin I, slow skeletal muscle) 人抗促卵泡抗體(Anti FSH Ab)
聚生殼菌磷化鈉離子/氫離子交換蛋白3抗體Human LGALS1(Galectin-1) 人抗促甲狀腺受體抗體(TRAb)
葡萄座腔菌神經穿透2抗體Human IL7R(Interleukin-7 receptor) 人抗補體1q抗體(C1q)
粟酒裂殖酵母腦啡肽2抗體Human STAT5A(Signal transducer and activator of transcription 5A) 人抗補體1q抗體(anti-C1q-antibody)
傳染性支氣管炎病毒Coronavirus│Infectious bronchitis virus 質量規格:≥50 U/mg,美侖金絲桃
波羅的海海源菌Idiomarina│baltica 質量規格:>98%,BR莪術
賴芽孢桿菌屬菌種Lysinibacillus│sp. 質量規格:>95%,羅氏進分雙去氧基姜黃
MCT1抑制劑(AZD3965)耶納農球 鄰乙酰氨基神經肽A
總狀毛霉 (2S, 4S)-4-二苯基膦-2-(二苯基膦甲基)-1-特丁氧羰基吡咯烷神經肽B
金黃隱球酵母 (2S,4R)-tert-butyl 4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)pyrr神經肽Y
楊爛皮殼蕉孢 乙鈷,四水神經肽S
杰丁塞伯林德納氏酵母 叔丁基化鎂神經粘附分子1
蘇云金芽胞桿 叔丁基化鎂神經粘附分子配體1
炭疽芽胞桿 5-硝基神經營養因子3
蘇云金芽胞桿達爾可他亞種 正丁基化鎂神經元微管相關蛋白2
沙雷氏屬 5-降冰烯-2-基乙酯(內型和外型的混合物)神經元烯化
三葉草根瘤 N-芐氧羰基-D-氨蛋白
栗疫病 正丁基鋰腎上腺
擬囊體側耳 DL-β-苯腎上腺髓質
德氏乳桿德氏亞種 煙乙酯腎
總狀共頭霉(編號83778測序復核為大麗輪枝) 4-甲基三氟甲苯腎活性
根白蟻傘 1,2-苯二乙腎損傷分子1
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