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貨號	FS-X10850

培養操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；

5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

中文名稱：Aurora B抑制劑(Hesperadin)

英文名稱：Hesperadin

產品規格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

貨號：FS-X10850

產品介紹:

Hesperadin是ATP競爭性Aurora B抑制劑，IC50為250nM。

注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！

號：422513-13-1

純度：99.67%

分子量：516.65

儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

產氮假單胞菌小鼠絨毛膜促性腺激βAnti-PLK3 Antibody人α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)

葉點霉屬人腫瘤特異生長因子/腫瘤相關因子Anti-PLXDC1 Antibody人α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)

楊奇青霉人色上皮衍生因子Anti-PMCH Antibody人α橫紋肌肌動蛋白(α-SCA)

產氣莢膜梭菌 C型小鼠性激結合球蛋白Anti-PLXNC1 Antibody人α橫紋肌肌動蛋白(α-SCA)

Chryseomicrobium imtechense人白介23Anti-PMS2CL Antibody人平滑肌肌球蛋白(SMM)

樹舌2-3小鼠脫氫表雄S7Anti-PNKP Antibody人平滑肌肌球蛋白(SMM)

金針菇（毛柄金錢菌、冬菇）人克拉拉蛋白Anti-PMEPA1 Antibody人心肌特異性肌鈣蛋白T(c)

pSH-EFIRES-B-AtAFB2-mCherry大鼠心肌營養1Anti-PNCK Antibody人心肌特異性肌鈣蛋白T(c)

成晶節桿菌大鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgAAnti-PMEPA1 Antibody人肌球蛋白重鏈(MHC)

釀酒酵母小鼠脫氫表雄Anti-PNN Antibody人肌球蛋白重鏈(MHC)

蛛網菌人低氧誘導因子1αAnti-PNPLA6 Antibody人熱休克蛋白27(HSP-27)

火木層孔菌人黑色抗體Anti-PNPLA8 Antibody人熱休克蛋白27(HSP-27)

豬丹絲菌小鼠高遷移率族蛋白B1Anti-PNPLA8 Antibody人血管抑/血管穩定蛋白(ANG)

泡盛曲霉大鼠脂蛋白αAnti-PODXL2 Antibody人血管抑/血管穩定蛋白(ANG)

金黃弗拉特氏菌人轉鐵蛋白受體Anti-POFUT1 Antibody人心型脂肪結合蛋白(h-FABP)

圍小叢殼小鼠內皮脂肪Anti-POFUT2 Antibody人心型脂肪結合蛋白(h-FABP)

跨膜蛋白4超家族成員3抗體番茄葉點菌人增生性瘢痕成纖維細胞

宮頸癌原癌基因8抗體貝氏葡萄座腔菌梨專化型人喉表皮樣癌細胞

腫瘤壞死因子α誘導蛋白8抗體新月彎孢霉小鼠結節性硬化癥細胞

跨膜蛋白161A抗體柿苗擬莖點霉人膽管細胞型肝癌細胞
Aurora B抑制劑(Hesperadin)腐皮鐮孢亞硫鈉瓊脂球蛋白輕鏈lambda

枯草芽孢桿龍膽紫血液瓊脂基礎抑制性蛋白

油鑒別試劑硫十二烷基鈉瓊脂內

球毛殼 PNB（對甲）內皮1

核黃氧化德沃斯氏 -6-羧內源性糖皮質

分枝節桿 WL營養瓊脂檸檬合

枯草芽孢桿改良沙氏瓊脂培養基檸檬合

有柄樹舌靈芝(白芝)（可訂購）沙氏BHI瓊脂凝集

黑木耳 -5-羧凝血原

地花 2-氨基-4-甲氧基-6-甲基-1,3,5-三皮質

露濕擬漆斑 1,2-雙(二苯基膦)乙烷皮質結合球蛋白

嗜糖土地芽孢桿 3-氨基-5-巰基-1,2,4-三氮唑皮質酮;腎上腺酮

密叢毛霉改良亞硫鹽瓊脂皮質抑

醬油曲霉 UBA培養基葡萄糖

果生核盤 NBB培養基葡萄糖-6-磷脫氫
操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)