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貨號	FS-X10698

培養操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；

5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

中文名稱：Bax誘導凋亡抑制劑

英文名稱：Bax inhibitor peptide V5

產品規格：5mg|10mg|25mg|50mg

貨號：FS-X10698

產品介紹:

Bax inhibitor peptide V5是一種Bax誘導凋亡的抑制劑，主要用于癌癥研究。

注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！

號：579492-81-2

別名：Val-Pro-Met-Leu-Lys;BIP-V5;BAX Inhibiting Peptide V5

純度：99.79%

分子量：586.79

儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

貝萊斯芽胞桿菌嗜中性粒抗原CD177抗原Anti-CD300LB AntibodyRasGTP激活蛋白1(RASA1)

根瘤菌CD24抗原Anti-CD300LD AntibodyRAS癌基因家族成員RAB5A(RAB5A)

蘇云金芽孢桿菌白分化抗原CD2APAnti-CD32(FCGR2C) AntibodyRAS癌基因家族成員RAB37(RAB37)

桂花耳*CD33抗原(大、小鼠）Anti-CD37 AntibodyRAS癌基因家族成員RAB1A(RAB1A)

秦氏蜜環菌CD34抗原（表面的唾液粘蛋白）Anti-CD3EAP AntibodyRAR相關孤兒受體γ(RORγ)

芽孢桿菌CD38多肽（小鼠、大鼠）Anti-CD53 AntibodyRap鳥核交換因子1(RAPGEF1)

嗜中溫寒冷桿菌CD38抗原（人）Anti-CD81 AntibodyRalA結合蛋白1(RALBP1)

解淀粉芽孢桿菌CD36（多肽）Anti-CD84 AntibodyRaftlin2蛋白(RFTN2)

阿姆斯特丹曲霉CD7抗原Anti-CD98 AntibodyRAD54樣蛋白2(RAD54L2)

解角質微桿菌CD40L抗原Anti-CD93 AntibodyRAD51同源物(RAD51)

大腸桿菌CD44抗原 (多肽抗原)Anti-CD97 AntibodyRAD23同源物B(RAD23B)

斐濟球腔菌抗皺寡肽-1/六勝肽-3/阿基瑞林/乙酰六勝肽-3Anti-CD70 AntibodyRAD1同源物(RAD1)

淡紫擬青霉醋促生長激釋放肽2Anti-CD99 AntibodyRac-GTP激活蛋白1(RACGAP1)

假單胞菌屬醋促生長激釋放肽6Anti-CDC14A AntibodyRab親和蛋白3A(RPH3A)

嗜麥芽寡單胞菌五勝肽/美容肽—M肽Anti-CDC16 AntibodyRabconnectin3蛋白(RC3)

聚生殼菌醋美拉諾坦IIAnti-CDC23 AntibodyRAB11家族相互作用蛋白3(RAB11FIP3)

組蛋白精甲基轉移5抗體耐硼賴芽孢桿菌大鼠腎足細胞

腫瘤錯配修復基因PMS1抗體少動鞘單胞菌人T淋巴細胞系

原鈣粘蛋白γA7抗體Acidovoraxsp.人骨髓瘤細胞

原鈣粘蛋白γA8抗體不動桿菌屬人胰腺癌細胞
Bax誘導凋亡抑制劑高滲曲霉鄰苯游離狀腺原

臭曲霉鄰甲苯游離甲狀腺

意外鏈霉 2-并咪唑促甲狀腺

乳桿屬 2-茚酮環形泰勒蟲IgM抗體

枯草芽胞桿 5-甲基環形泰勒蟲IgA抗體

類腸膜魏斯氏二烯基鹽鹽戊糖

安妥檢測試紙（鼠藥）鄰甲苯異酯硫氧還蛋白還原

血紅栓鄰苯氧乙血管緊張轉化

葡酒色傘枝霉苯甲酰透明質

島生異擔子 2-萘基溴甲基酮多巴

網狀鐮孢 4,4'-二甲基聯苯嘔吐霉

乳白栓孔 5-溴-2-氨基噻唑氫鹽M1

芽胞桿 (S)-3-氨基-1,2-

郝氏青霉 2-喹啉流行熱病

福山假絲酵母 3-甲基喹啉精
操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)