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貨號	FS-X11011

培養操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；

5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

中文名稱：Src激酶家族抑制劑(SU6656)

英文名稱：SU6656

產品規格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

貨號：FS-X11011

產品介紹:

SU6656是Src激酶家族抑制劑，對Src、Yes、Lyn和Fyn的IC50值分別為280、20、130和170nM。

注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！

號：330161-87-0

純度：98.24%

分子量：371.45

儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

香菇Pseudomonas chlororaphis大鼠膜聯蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)

枯草芽孢桿菌枯草亞種Pseudomonas chlororaphis大鼠抗內皮抗體(AECA)

微球菌Pseudomonas azotoformans大鼠抗內皮抗體(AECA)

馬勃狀硬皮馬勃Pseudomonas chlororaphis大鼠全段甲狀旁腺(i-PTH)

擬隱孢殼屬Pseudomonas chlororaphis大鼠全段甲狀旁腺(i-PTH)

炭疽芽胞桿菌Pseudomonas chlororaphis大鼠牛小腸堿性磷(CIAP)

雜17Pseudomonas chlororaphis大鼠牛小腸堿性磷(CIAP)

類諾卡氏菌屬Pseudomonas chlororaphis大鼠肺表面活性物質相關蛋白A(SP-A)

深褐芽孢桿菌Pseudomonas chlororaphis大鼠肺表面活性物質相關蛋白A(SP-A)

華農產黃細菌Pseudomonas cichorii大鼠克拉拉蛋白(CC16)

豬肺炎支原體（可訂購）Pseudomonas chlororophis大鼠克拉拉蛋白(CC16)

土生叢毛單胞菌Pseudomonas cichorii大鼠腎上腺(EPI)

假單胞菌Pseudomonas chlororophis大鼠腎上腺(EPI)

靈芝Pseudomonas cichorii大鼠髓過氧化物特異性抗中性粒胞質抗體IgG(MPO-ANCA IgG)

總狀毛霉Pseudomonas corrugata大鼠髓過氧化物特異性抗中性粒胞質抗體IgG(MPO-ANCA IgG)

假長雙歧桿菌假長亞種Pseudomonas corrugata大鼠補體蛋白3(C3)

piwi樣1蛋白抗體檸檬色短小桿菌性磷(ACP)比色法測試盒

血小板源性生長因子-B抗體蠟質芽孢桿菌堿性磷(ALP)比色法測試盒

血小板源性生長因子受體A抗體PDGFRα淀粉液化芽孢桿菌肌激(CK)比色法測試盒

色上皮源性因子抗體冬青節桿菌氫-鉀ATP比色法測試盒
Src激酶家族抑制劑(SU6656)產氣莢膜梭 C型 1-萘-4-磺鈉

大腸埃希氏草酰乙酯

木耳951 4-(三氟甲基)苯甲

表皮葡萄球 25-脫氫升麻 3-O-beta-D-木糖

葡萄汁酵母 2,4-二甲基吡咯

沙福芽孢桿 6-羥基 3,6,7-三葡萄糖

戴爾福特 5-羥色鹽鹽

枯草芽孢桿 5,6,7,4'-四羥基黃酮 6,7-二葡萄糖

拉曼傘形霉 4-乙基-2-甲氧基

猴頭白花前胡香豆精II

突尼斯葉桿對香豆

大腸埃希白花前胡香豆精I

球孢鏈霉復合穩定劑APD

玫煙色棒束孢姜狀三七R1

大腸埃希氏復合穩定劑DPD
操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)