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泛class IPI3K抑制劑

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更新時間:2022-05-18 11:31:17瀏覽次數(shù):158次

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貨號 FS-X10326
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phospho C-Myc(pThr58/pSer62)/FITC 熒光標(biāo)記抗化致癌因C-Myc抗體IgG咪唑 99%
phospho C-Met/pHGFR(pTyr1365)/FITC 熒光標(biāo)記抗化原癌因c-Met抗體IgG胰島 ≥

中文名稱:class IPI3K抑制劑

英文名稱:NVP-BKM120

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg

貨號:FS-X10326

產(chǎn)品介紹:

英文名稱:NVP-BKM120

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg

NVP-BKM120是一種泛class IPI3K抑制劑,作用于p110α/p110β/p110δ/p110γ,IC50分別為52nM/166nM/116nM/262nM。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

號:944396-07-0

別名:Buparlisib;BKM120

純度:99.68%

分子量:410.39

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

類干酪乳桿菌凋亡信號調(diào)節(jié)激1抗體Human NUDCD3 軟骨糖蛋白39(HC gp-39)

抗生鏈霉菌NFKB激活蛋白1抗體Human GNRH1(Progonadoliberin-1) 軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(COMP)

熒光假單胞菌磷化Myc基因相關(guān)X因子抗體Human NUDT10 軟骨寡聚蛋白(COMP)

出芽短梗霉亞甲基四氫葉還原MTHFR抗體Human NUDT11(Diphosphoinositol polyphosphate phosphohydrolase 3-beta) 乳脂肪球EGF因子蛋白(MFGE8)

香菇MEK1/MAPKK1抗體(N-端)Human NUDT16 癌易感蛋白2(BRCA-2)

三隔鐮刀菌褪黑受體1B抗體Human NUDT12 癌易感蛋白1(BRCA-1)

天格爾黃桿菌多藥耐藥相關(guān)蛋白4抗體Human NUDT19 乳鐵蛋白(LTF)

柑橘藻斑病*多藥耐藥相關(guān)蛋白5抗體Human NUDT2 乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG(LF/LTF Ab-Ig)

紡錘形賴芽孢桿菌線粒體內(nèi)膜蛋白抗體Human NUDT2 乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)

空泡單胞菌基質(zhì)金屬蛋白-8/膠原2抗體Human NUDT16 乳糖凝集8(LGALS8)

地衣芽孢桿菌基質(zhì)金屬蛋白11抗體Human NUAK2 乳脫氫A(LDHA)

食蔗糖葡糖醋桿菌基質(zhì)金屬蛋白-12抗體Human NUAK2 乳脫氫(LDH)

釀酒酵母基質(zhì)金屬蛋白-15抗體Human NUDT19 乳清磷核糖轉(zhuǎn)移(OPRT)

炭疽沉淀血清基質(zhì)金屬蛋白-16抗體Human NUB1 乳過氧化物(LPO)

膠胞(可訂購)基質(zhì)金屬蛋白-17抗體Human NUDT21 肉瘤抗原1(SAGE1)

皮落青霉膜突蛋白抗體Human NUBP2(Nucleotide-binding protein 2) 肉堿脂酰轉(zhuǎn)移(CACT)

嗜熱脂肪地芽抱桿菌Geobacillus│stearothermophilus 質(zhì)量規(guī)格:藥物研究配體五味子

南瓜細(xì)基格孢Ulocladium│cucurbitae 質(zhì)量規(guī)格:藥物研究配體五味子乙

傳染性支氣管炎病毒Coronavirus│Infectious bronchitis virus 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(N)五味子
class IPI3K抑制劑秦氏蜜環(huán) L-亮氨酰甘阿立新A

草生毛霉 茶樹油癌胚抗原

芽孢桿屬 2-氨基-3-吡氨酰磷合成I

龍舌蘭盤孢 3-羥基氨基脲敏感性氧化

鏈孢囊 2-羥基-5-硝基煙白蛋白

黑曲霉 2-溴-2′-乙酮白蛋白

玫瑰暗黃鏈霉 4--7-甲氧基喹啉白介-18結(jié)合蛋白

地中海中慢生根瘤* 乙酰酮鎂白介1α

扣囊復(fù)膜孢酵母 1,3-二乙烯基-1,1,3,3-四甲基二硅氧烷鉑(0)白介2受體

鼠李糖乳桿 2-溴甲基-6-白念珠烯化

紅城紅球 聚氧化乙烯白三烯B4

根瘤 聚氧化乙烯白三烯B5

熱帶假絲酵母 聚氧化乙烯白三烯C4

大腸埃希氏定量質(zhì)控株* 聚氧化乙烯白三烯D4

群結(jié)腐霉 聚氧化乙烯白介1

 


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