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貨號 | FS-X10509 |
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中文名稱:Vps34抑制劑(Vps34-IN-1)
英文名稱:Vps34-IN-1
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號:FS-X10509
產品介紹:
英文名稱:Vps34-IN-1 產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg Vps34-IN-1是Vps34的抑制劑,來自WO/2012085815A1,化合物實例16a;IC50值為4nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! 號:1383716-33-3 純度:99.64% 分子式:C??H??ClN?O 分子量:425.91 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
意大利酵母血栓A2受體抗體Anti-HNRNPL Antibody晚期糖基化終末產物受體(AGER)
布魯氏菌 生物Ⅴ型Toll樣受體11抗體Anti-HOMER3 Antibody晚期糖基化終末產物(AGE)
金霉鏈霉菌(生金色鏈霉菌)血小板反應蛋白抗體Anti-HOXA10 Antibody烷基甘油單加氧(AGMO)
無端粒相關蛋白2/端粒逆轉錄抗體Anti-HOXA10 Antibody外周鞘磷脂蛋白22(PMP22)
圓酵母屬血小板反應蛋白2/凝血敏感蛋白2抗體Anti-HOXA10 Antibody外周蛋白2(PRPH2)
白色彎曲嗜菌四分子交聯體17抗體(四旋蛋白)Anti-HOXA11 Antibody外周蛋白(PRPH)
赤霉屬髓系觸發受體1抗體Anti-HOOK2 Antibody外異蛋白A(EDA)
大腸埃希氏菌緊密連接蛋白2抗體Anti-HOOK3 Antibody外血小板溶1(EPPK1)
枝狀枝孢磷化埃茲蛋白抗體Anti-HOXA3 Antibody外生骨疣樣蛋白1(EXTL1)
節桿菌單克抗體Anti-HOXA4 Antibody外生骨疣蛋白2(EXT2)
冷海水黃桿菌微管相關蛋白α6抗體Anti-HOXA5 Antibody外生骨疣蛋白1(EXT1)
淡紫紫霉T淋巴轉錄調節因子TFEB抗體Anti-HOXA6 Antibody外切體成分9(EXOSC9)
玉乳桿菌轉鐵蛋白單克抗體Anti-HOXA7 Antibody外切體成分8(EXOSC8)
鴨疫里氏桿菌促甲狀腺抗體Anti-HOXB9 Antibody外切體成分7(EXOSC7)
金針菇(毛柄金錢菌、冬菇)促甲狀腺單克抗體Anti-HP Antibody外切體成分6(EXOSC6)
皺木耳磷化轉化生長因子β活化激1Anti-HOXD11 Antibody外切體成分5(EXOSC5)
神經突觸13抗體谷棒桿菌人神經元細胞
多配體聚糖結合蛋白2抗體宇佐美曲霉變種人神經星形膠質細胞
胞吐分泌蛋白Sec6抗體布氏乳桿菌人腦動脈血管平滑肌細胞
突觸結合蛋白11抗體乳桿菌屬人腦膜成纖維細胞
Vps34抑制劑(Vps34-IN-1)醋桿屬 5-羥基-2-甲球蛋白G2a
熱小鏈地芽孢桿 1,1′-雙(二異基膦基)二茂鐵二化鈀球蛋白M
松針層孔* 乙烯基二苯基膦凝聚
豇豆慢生根瘤 3,5-二甲基-4-甲氧基Ⅷ
蘋果鏈格孢 硫化銀皮質
弗雷德里克斯堡假單胞 Mianserin HCl熱休克蛋白96
蘇云金芽孢桿 倍他松 17-戊酯絨毛膜促性腺
光伏希瓦氏 2,3-二氟苯甲三葉因子3
假單胞 2-溴-1,3,5-三異基苯腎損傷分子1
乳桿屬 2,5-二羥基甲酯松弛肽;松弛
細鏈格孢 3,5-二羥基甲酯外源性α干擾
孟氏假單胞 3,4-二甲氧基甲酯外源性γ干擾
異常漢遜酵母 6-二氟-4-羥基信號轉導分子1
貪噬 2-氨基-6-雄
棒桿屬 2-溴吡啶-5-頻哪酯循環復合物
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