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貨號 | FS-X11002 |
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產品介紹:
LY2409881是IKK2高效選擇性抑制劑,IC50值為30nM,對IKK1和其他激酶抑制力弱。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! 號:946518-61-2 純度:98.77% 分子量:485.04 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
中文名稱:IKK2抑制劑(LY2409881)
英文名稱:LY2409881
產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號:FS-X11002
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
青色鏈霉菌Rhizobium galegae大鼠骨形成蛋白6(BMP-6)
淡紫灰吸水鏈霉菌Rhizobium galegae大鼠淋巴因子
釀酒酵母Rhizobium galegae大鼠淋巴因子
Rhizobium galegae大鼠N-乙酰基-絲酰-天門冬酰-賴酰-脯(AcSDKP)
葡萄牙棒孢酵母Rhizobium galegae大鼠N-乙酰基-絲酰-天門冬酰-賴酰-脯(AcSDKP)
假單胞菌屬Rhizobium galegae大鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)
栗酒裂殖酵母Rhizobium galegae大鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)
藤黃微球菌Rhizobium galegae大鼠Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)
乳片球菌Rhizobium galegae大鼠Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)
阿納托利亞正青霉Rhizobium galegae大鼠熱休克蛋白27(HSP-27)
核盤菌Rhizobium galegae大鼠熱休克蛋白27(HSP-27)
平菇Rhizobium galegae大鼠Smad1
腐皮鐮孢菌Rhizobium galegae大鼠Smad1
枯草芽孢桿菌Rhizobium galegae大鼠Smad7
油鑒別試劑 Rhizobium galegae大鼠Smad7
球毛殼Rhizobium galegae大鼠26S蛋白體(26S PSM)
泛連接抗體墨西哥劍菌人體胚胎干細胞
多型性腺瘤基因樣蛋白1抗體薄皮干酪菌人神經干細胞
神經叢蛋白B2抗體黃傘視網膜Muller干細胞
血小板源性生長因子A抗體白囊耙齒菌小鼠胚胎干細胞EDJ#22(干細胞庫保藏)
IKK2抑制劑(LY2409881)蠟狀芽孢桿 前胡 A
多源中間根瘤 聚乙二300
合歡枯萎病 12-羥基異補骨脂
華癸中間根瘤
無二檸檬桿 伽升沃E
猴頭 新環桑色烯
類芽孢桿 吡蟲啉
反芻雙歧桿 4'-羥基-5,6-脫氫醉椒
寄生彎孢聚殼 血竭黃烷A
食腺芽生葡萄孢酵母 卡波姆940
毛球屬 龍血D
釀酒酵母 山豆根黃烷酮A
金灰青霉 原花青
棲土曲霉 3',5'-二異戊烯基金雀異黃
蠟狀芽孢桿 楮樹黃酮F
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