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CDK1抑制劑(Ro-3306)

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-18 13:55:49瀏覽次數(shù):168次

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貨號 FS-X10426
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Mouse human IgG/ Bi

中文名稱:CDK1抑制劑(Ro-3306)

英文名稱:Ro-3306

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

貨號:FS-X10426

產(chǎn)品介紹:

英文名稱:Ro-3306

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

Ro-3306是一種有效的,選擇性的CDK1抑制劑,對CDK1,CDK1/cyclin B1和CDK2/cyclin E的Ki值為分別為20nM,35nM和340nM。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

號:872573-93-8

純度:96.77%

分子量:351.45

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

小平菇(秀珍菇)磷化P63腫瘤抑制基因抗體Anti-C9orf72 AntibodyToll樣受體4(TLR4)

小單孢菌磷化P63腫瘤抑制基因抗體Anti-CA1 AntibodyToll樣受體3(TLR3)

橢園釀酒酵母蛋白甘露糖基轉移1抗體Anti-CA12 Antibodytoll樣受體2(TLR2)

熱帶假絲酵母磷化嗜中性粒胞漿因子4抗體Anti-CA2 AntibodyToll樣受體1(TLR1)

鴨疫里氏桿菌核糖體S6蛋白激β2抗體Anti-CA4 AntibodyTH糖蛋白(THP)

松針散斑殼磷化核糖體S6蛋白激β2抗體Anti-CA3 Antibody(PB1104)TGF-β誘導早期基因1(TIEG1)

根瘤菌磷化核糖體S6蛋白激β2抗體Anti-CACNA1C Antibody(PB0394)Tau蛋白(TAU)

威爾酵母磷化核糖體S6蛋白激β2抗體Anti-CA4 AntibodyTau-231蛋白(TAU-231)

謝瓦散囊菌磷化核糖體S6K2蛋白激抗體Anti-CACNA2D2 AntibodyTau-181蛋白(TAU-181)

小克銀漢霉C0磷化腫瘤抑制基因P53抗體Anti-CACYBP AntibodyTAR DNA結合蛋白43(TARDBP/TDP43)

植物乳桿菌磷化腫瘤抑制基因P53抗體Anti-CACNA1D Antibody(PB0286)s腺同型半胱(SAH)

魚乳桿菌磷化腫瘤抑制基因P53抗體Anti-CAD AntibodySyndecan-3/(SDC3)

卷枝毛霉卷枝變型磷化腫瘤抑制基因P53抗體Anti-CACYBP AntibodySyndecan-1/CD138(SDC1)

毛柄金錢菌(金針菇)磷化腫瘤抑制基因P53抗體Anti-CALB2 AntibodySTEAP家族成員4(Steap4)

黑曲霉磷化腫瘤抑制基因P53抗體Anti-CALB1 Antibody(PB0017)STEAP家族成員1(Steap1)

大腸桿菌磷化腫瘤抑制基因P53抗體Anti-CADM1 AntibodyStathmin 1(STMN1)

: AS4.252資源名稱: 白黃鏈霉菌 質量規(guī)格:>99%

: AS4.166資源名稱: 黃色長孢鏈霉菌 質量規(guī)格:0.98

金頂側耳Pleurotus│citrinopileatus Singer 質量規(guī)格:>99%,BR
CDK1抑制劑(Ro-3306)大腸埃希氏 二烯二乙二酯谷脫羧1

栗疫 4-羥基-1-茚酮谷脫羧2

灰玫瑰青霉 雙(三-o-甲苯基膦)二化鈀(II)脂肪連接

墻支頂孢 2-羥基-4-甲氧基-5-磺二苯甲酮硬脂酰去飽和2

蘇云金芽孢桿 (S,S)-(-)-雙(α-甲芐基)鹽鹽弓形蟲IgG抗體

科恩氏 2.6-二氟-4-甲氧基苯血小板膜糖蛋白纖維蛋白原受體

球形賴芽孢桿 雙酮-D-半乳糖可溶性血纖蛋白單體復合物

美澳型核果褐腐病 烯基二二甲酯Ⅶ

短波單胞 2-乙酰氧基異丁酰溴V

白鱗炭角 5′-O-(4,4′-二甲氧基三苯甲基)胸Ⅺ

斯氏李斯特氏 N-BOC-2-氨基-5-溴噻唑線粒體呼吸鏈復合物I

變天藍鏈霉 4-(二甲基氨甲酰基)苯Xa

糞鞘氨桿 三丁雙(三氟甲磺酰)亞XIa

根瘤 N,N'-雙芐氧羰基-L-賴Disabled同源物1

短芽孢桿屬 3-氟-4-羥基苯磷化Disabled同源物1

 


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